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| 甘蔗双低频酶cDNA-AFLP体系的优化 | |
| 引用本文： | 郭静,林荣华,胡薇,陈由强,陈如凯.甘蔗双低频酶cDNA-AFLP体系的优化[J].生物技术,2010,20(4):34-37. |
| 作者姓名： | 郭静 林荣华 胡薇 陈由强 陈如凯 |
| 作者单位： | 1. 福建师范大学生命科学学院,福建 福州 350108;农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福建 福州 350002;发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室,福建 福州 350108 2. 福建师范大学生命科学学院,福建,福州,350108 3. 农业部甘蔗遗传改良重点开放实验室,福建,福州,350002 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30871575)；国家高技术研究发展计划“863”课题(SQ2007AA10XK140067)；现代农业产业技术体系建设专项资金 |
| 摘 要： | 目的：建立一个适合于甘蔗（Saccharum officenarum）为研究材料的cDNA-AFLP反应的优化体系。方法：用Rever-tAidTM First Strandc DNA Synthesis Kit反转录获得第一链,用Rnase H、E.coliDNA聚合酶Ⅰ和E.coliDNA连接酶合成双链cDNA,用双低频酶EcoRⅠ和PstⅠ对dscDNA酶切,连接,预扩增,和选择性扩增的关键因素进行分析。结果：500ng的dscDNA双酶切5h,将16℃过夜连接的产物稀释1倍用作预扩增的模板,预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增模板,6%聚丙烯酰胺凝胶检测及银染,扩增条带均匀分布,清晰可辨且主要分布在200～2000bp之间。结论：该体系具有稳定性高,重复性好等优点,可用于甘蔗cDNA-AFLP分析。 |
| 关 键 词： | 甘蔗 cDNA-AFLP 体系优化 |
Screening of cDNA-AFLP Technic with Two Low-frequency Cut Enzyme in Saccharum officenarum |
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| GUO Jing,LIN Rong-hua,HU Wei,CHEN You-qiang,CHEN Ru-kai.Screening of cDNA-AFLP Technic with Two Low-frequency Cut Enzyme in Saccharum officenarum[J].Biotechnology,2010,20(4):34-37. | |
| Authors: | GUO Jing LIN Rong-hua HU Wei CHEN You-qiang CHEN Ru-kai |
| Abstract: | |
| Keywords: | cDNA-AFLP |
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