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重组人ERP57蛋白克隆和原核表达
引用本文:杨建林,韩钰,王艳林,张伟.重组人ERP57蛋白克隆和原核表达[J].生物技术,2010,20(3):28-30.
作者姓名:杨建林  韩钰  王艳林  张伟
作者单位:三峡大学分子生物学研究所,湖北,宜昌,43002
基金项目:国家自然科学基金,校级青年科学基金 
摘    要:目的:克隆人ERP57蛋白进行原核表达和纯化。方法:采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57原核表达质粒(pET-28a/ERP57)并转化E.coli的BL21菌株。IPTG诱导蛋白表达,并在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化。分别用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功获得大小为1518bp的人ERP57基因片段,转化菌诱导性表达61kDa的人ERP57蛋白,该蛋白可经Ni-NTA树脂亲和层析高度纯化。结论:成功获得纯化的重组人ERP57蛋白,为后续ERP57蛋白功能研究奠定了基础。

关 键 词:ERP57  基因克隆  人重组蛋白  原核表达  蛋白纯化

Cloning and Prokaryotic Expression of Human Recombinant ERP57
YANG Jian-lin,HAN Yu,WANG Yan-lin,ZHANG Wei.Cloning and Prokaryotic Expression of Human Recombinant ERP57[J].Biotechnology,2010,20(3):28-30.
Authors:YANG Jian-lin  HAN Yu  WANG Yan-lin  ZHANG Wei
Abstract:
Keywords:ERP57
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