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| FOXL2酵母双杂交诱饵载体构建及检测 | |
| 引用本文： | 张伟,黄旭东,韩小波,任珊珊,王小柯,李艳艳,唐胜建.FOXL2酵母双杂交诱饵载体构建及检测[J].生物技术,2011,21(3). |
| 作者姓名： | 张伟 黄旭东 韩小波 任珊珊 王小柯 李艳艳 唐胜建 |
| 作者单位： | 1. 潍坊医学院整形外科医院,山东潍坊,261042 2. 潍坊眼科医院,山东潍坊,261041 3. 莒县人民医院骨二科,山东日照,276500;潍坊医学院整形外科医院,山东潍坊,261042 |
| 基金项目： | 国家科学自然基金项目("小睑裂综合征 |
| 摘 要： | 目的:用FOXL2编码区片段构建酵母双杂交诱饵质粒并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测.方法:PCR扩增FOXl2编码区DNA片段,克隆入pGBKT7质粒,转化至DH-5α大量扩增后提取质粒,经PCR、酶切和测序验证,再转化至Y187酵母菌株中用缺陷培养基筛选并进行自激活和毒性检测.结果:获得FOXL2基因1137bp片段,并成功将人类正常和一突变型FOXL2编码区克隆人pGBKT7中,经检测在SD/-Trp/X-α-Gal单缺培养基平板上无蓝色菌斑出现,在SD/-Ade/-Trp培养基平板无生长.同时在SD/-Trp/Kana(20μg/ml)培养24h后测得菌液OD600≥0.8,说明重组诱质粒无自激活活性和酵母毒性,满足作为诱饵质粒的条件.结论:成功构建了正常及突变型的FOXL2酵母杂交诱饵质粒;为进一步利用酵母双杂交技术研究与FOXL2相互作用的蛋白打下坚实基础. |
| 关 键 词： | FOXL2 BPES 酵母双杂交 |
Construction and Detection of FOXL2 Bait Plasmid of Yeast Two-hybrid System |
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| ZHANG Wei,HUANG Xu-dong,HAN Xiao-bo,REN Shan-shan,WANG Xiao-ke,LI Yan-yan,TANG Sheng-jian.Construction and Detection of FOXL2 Bait Plasmid of Yeast Two-hybrid System[J].Biotechnology,2011,21(3). | |
| Authors: | ZHANG Wei HUANG Xu-dong HAN Xiao-bo REN Shan-shan WANG Xiao-ke LI Yan-yan TANG Sheng-jian |
| Abstract: | |
| Keywords: | FOXL2 BPES yeast two-hybrid system |
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