| 人PD1胞外须基因的克隆、蛋白表达及抗体制备 |
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| 引用本文： | 史继静,刘朝奇,李斌,覃晓玲,任东明.人PD1胞外须基因的克隆、蛋白表达及抗体制备[J].生物技术,2010,20(3):23-25. |
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| 作者姓名： | 史继静 刘朝奇 李斌 覃晓玲 任东明 |
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| 作者单位： | 三峡大学分子生物学研究所,湖北,宜昌,443002 |
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| 摘 要： | 目的：研究人PD1的生物学活性,制备人PD1胞外段区域及其特异性抗体。方法：用PCR方法扩增编码人PD1胞外段的基因序列（hPD1ecr）,将其克隆到原核表达载体pET28a（＋）中,并转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blot鉴定。纯化目的蛋白免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验（ELISA）,流式细胞术检测抗体滴度及其特异性。结果：原核表达载体pET28a（＋）-PD1ecr成功构建,并可在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,得到的PD1胞外区蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定正确。用纯化蛋白免疫日本大耳白兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论：得到纯化的人PD1胞外蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下人PD1蛋白,为进一步研究PD1功能奠定了实验基础。
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| 关 键 词： | 人PD1胞外段基因 原核表达 免疫原性 多克隆抗体 |
Expression of Human PD1 ecr and Its Antibody Preparation |
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| SHI Ji-jing,LIU Chao-qi,LI Bin,QIN Xiao-ling,REN Dong-ming.Expression of Human PD1 ecr and Its Antibody Preparation[J].Biotechnology,2010,20(3):23-25. |
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| Authors: | SHI Ji-jing LIU Chao-qi LI Bin QIN Xiao-ling REN Dong-ming |
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