| 扩展青霉脂肪酶K56R叠加突变对热稳定性的影响 |
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| 引用本文： | 沈麟,施文芳,胡长浩,林琳.扩展青霉脂肪酶K56R叠加突变对热稳定性的影响[J].生物技术,2009,19(2). |
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| 作者姓名： | 沈麟 施文芳 胡长浩 林琳 |
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| 作者单位： | 福建师范大学生命科学学院,福建福州,350108 |
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| 基金项目： | 福建省科技平台项目，国家自然科学基金，福建省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:扩展青霉脂肪酶随机突变体ep8是一株热稳定性比野生型有所提高的突变体.获得热稳定性提高的优良菌株.方法:在ep8的基础上利用重叠延伸PCR构建叠加突变重组质粒pPIC3.5K-ep8一K56R,将该质粒电转毕赤酵母(Pichia paaoris)GS115进行异源表达.结果:该叠加突变脂肪酶在毕赤酵母中获得了活性表达.15%SDS-PACE结果分析表明突变脂肪酶PEL-ep8-K56R-GS分子量与野生型PEL-GS一致,约为28kDa.叠加突变脂肪酶在37℃时酶活为852U/mL、野生型为760u/mL、随机突变体为824u/mL,叠加突变体酶活相比野生型提高了21.1%,相比随机突变体提高了3.4%.热稳定性分析数据表明叠加突变脂肪酶Tm值为40.1℃、野生型为38.7℃、随机突变体为39.9℃,Tm值相比野生型提高了1.4℃,相比随机突变体提高了0.2℃.
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| 关 键 词： | 扩展青霉脂肪酶 叠加突变 热稳定性 |
K56R Double - Mutagenesis Effected Thermostability of Penicillium expansum Lipase |
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| SHEN Lin,SHI Wen-fang,HU Chang-hao,LIN Lin.K56R Double - Mutagenesis Effected Thermostability of Penicillium expansum Lipase[J].Biotechnology,2009,19(2). |
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| Authors: | SHEN Lin SHI Wen-fang HU Chang-hao LIN Lin |
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