| 猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在乳酸菌中的表达 |
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| 引用本文： | 唐丽杰,欧笛,王荣军,徐义刚,钟涛,李一经.猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在乳酸菌中的表达[J].生物技术,2007,17(6):4-8. |
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| 作者姓名： | 唐丽杰 欧笛 王荣军 徐义刚 钟涛 李一经 |
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| 作者单位： | 东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 |
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| 摘 要： | 目的：构建猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的细胞内表达重组乳酸乳球菌，确定其最佳表达条件，为重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪传染性胃肠炎奠定基础。方法：根据猪传染性胃肠炎病毒纤突（S）蛋白的全基因序列及表达载体质粒的基因融合特点，设计一对引物，进行PCR，获得含有TGEV S基因4个主要抗原位点的约2000bp目的片段，将其与表达载体质粒pNZ8048进行连接，通过电转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内，在乳链菌肽（Nisin）的诱导下进行表达，确定最佳表达条件；并通过SDS-PAGE进行检测和Western-blot分析表达蛋白活性。结果：成功获得了TGEV S蛋白在乳酸乳球菌细胞内的表达并且表达的蛋白具有TGE全病毒的抗原性。确定了乳酸乳球菌表达TGEV S蛋白的最佳表达条件为在以1ng/ml的乳链杆菌肽nisin诱导下，诱导后3h，重组蛋白表达效率达最高，重组蛋白约占菌体总蛋白含量的8．7％。结论：在乳酸乳球菌细胞内表达的重组TGEV S蛋白获得了理想表达，为进一步研制开发防治TGE口服疫苗提供物质基础。
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| 关 键 词： | TGEV S蛋白 乳酸菌 表达及分析 |
| 文章编号： | 1004-311X（2007）06-0004-05 |
| 收稿时间： | 2007-04-18 |
| 修稿时间： | 2007-09-23 |
Expression of Porcine Transmissible Gastroenteritis Coronavirus Spike Glycoprotein in Lactobacillus |
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| TANG Li-jie,OU Di,WANG Rong-jun,XU Yi-gang,ZHONG Tao,LI Yi-jing.Expression of Porcine Transmissible Gastroenteritis Coronavirus Spike Glycoprotein in Lactobacillus[J].Biotechnology,2007,17(6):4-8. |
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| Authors: | TANG Li-jie OU Di WANG Rong-jun XU Yi-gang ZHONG Tao LI Yi-jing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TGEV S glycoprotein Lactobacillus expression and analysis |
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