| 家蝇抗菌肽Cecropin-His_6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建 |
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| 引用本文： | 徐建华,朱家勇,金小宝,许琴英.家蝇抗菌肽Cecropin-His_6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建[J].生物技术,2005,15(1):3-7. |
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| 作者姓名： | 徐建华 朱家勇 金小宝 许琴英 |
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| 作者单位： | 广东药学院生物技术实验室,广东,广州,510224 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划社会发展攻关项目 (2 0 0 3B31 60 2 )，广州市科技计划社会发展攻关项目 (2 0 0 3J-C0 0 2 1 ) |
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| 摘 要： | 克隆家蝇幼虫抗菌肽Cecropin -His 6融合基因 ,构建其真核表达载体 ,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。该文从家蝇幼虫组织中提取总RNA ,RT -PCR扩增编码Cecropin开放阅读框cDNA序列 ,将其克隆至pUCm -T载体进行序列测定 ;然后用含 6×His标签序列的下游引物克隆Cecropin -His 6融合基因 ,并将其构建于真核表达载体pcDNA3.1( )中 ;同时应用生物信息学对融合基因的理化性质和二级结构进行预测分析。结果表明 ,RT -PCR扩增得到约 2 30bp的目的cDNA片段 ,与Genebank中报道的家蝇CecropincDNA序列存在一个无义变异差异 (Lys:AAG→AAA) ;6×His标签成功融合到Cecropin的C端。Cecropin -His 6融合基因的克隆和真核表达载体的成功构建 ,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。
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| 关 键 词： | 家蝇 抗菌肽 基因克隆 生物信息学分析 真核表达载体 |
| 文章编号： | 1004-311X(2005)01-0003-05 |
| 修稿时间： | 2004年7月16日 |
Molecular Cloning and Sequence Analysis of Cecropin-His_ 6 Fusion Gene from Musca domestica and Construction of Its Expression Vector |
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| XU Jian-hua,ZHU Jia-yong,JIN Xiao-bao,XU Qin-ying.Molecular Cloning and Sequence Analysis of Cecropin-His_ 6 Fusion Gene from Musca domestica and Construction of Its Expression Vector[J].Biotechnology,2005,15(1):3-7. |
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| Authors: | XU Jian-hua ZHU Jia-yong JIN Xiao-bao XU Qin-ying |
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| Keywords: | Musca domestica antibacterial peptide gene cloning bioinformatic analysis eukaryotic expression vector |
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