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单细胞因子支持人胚胎干细胞生长的培养体系
引用本文:许慧芳,陈国华,黎逢光,陈红,张苏明.单细胞因子支持人胚胎干细胞生长的培养体系[J].生物技术,2015(2):191-195.
作者姓名:许慧芳  陈国华  黎逢光  陈红  张苏明
作者单位:武汉市一医院神经内科;中国人民解放军161医院神经内科;华中科技大学同济医学院附属同济医院康复科;华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科
基金项目:国家自然科学基金项目(“脊髓运动神经元发育相关microRNA的筛选及鉴定”,No.30600188);武汉市学科带头人计划(“MAPC源性内皮细胞Akt自磷酸化在血管形成中的作用”,No.201271130458);湖北省自然科学基金重点项目(“骨髓干细胞源性内皮细胞在颈动脉损伤修复中的作用机制”,No.CDA061)资助
摘    要:目的]为2株中国人胚胎干细胞系建立培养液中仅添加1种细胞因子的培养体系。方法]两株人胚胎干细胞h ES-846XX和h ES-18 46XY分别使用含有成纤维细胞生长因子(b FGF)160ng/ml、转化生长因子(TGFβ1)20ng/ml和noggin 200ng/ml的培养液进行无饲养层培养,观察细胞的生长情况并对所得细胞进行鉴定。结果]培养液中添加b FGF 160ng/ml可以有效地支持人胚胎干细胞的长期增殖,传代8次的细胞仍然保持胚胎干细胞的特性。添加TGFβ1或noggin的培养基无法维持人胚胎干细胞的长期增殖,3代以后细胞完全分化。结论]证明培养液单独添加高浓度b FGF 160ng/ml支持2株中国人胚胎干细胞长期保持未分化状态增殖,实际未分化率为68.2±1.08%。

关 键 词:人胚胎干细胞  成纤维细胞生长因子  转化生长因子  noggin  无饲养层培养
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