表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组马立克氏病毒的构建 |
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引用本文: | 刘红梅,秦爱建,叶建强,陈鸿军,邵红霞,金文杰,刘岳龙.表达传染性法氏囊病毒VP2蛋白的重组马立克氏病毒的构建[J].Virologica Sinica,2006,21(3):257-260. |
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作者姓名: | 刘红梅 秦爱建 叶建强 陈鸿军 邵红霞 金文杰 刘岳龙 |
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作者单位: | 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室 江苏扬州225009 |
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基金项目: | 国家863高技术项目(863-2002AA245051);全国博士学位论文作者专项资金(200256). |
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摘 要: | 用聚合酶链式反应(PCR)方法从真核表达载体pcDNA3.1-VP2中扩增出包含CMV和polyA的VP2表达盒基因片段,经琼脂糖凝胶电泳大小为2.4kb;将该基因片段插入马立克氏病病毒(MDV)CVI988//Rispens的非必需区US10片段中,经SphI酶切分析获得大小为6.0和2.4kb两个片段,表明成功构建出表达VP2基因的MDVCVI988转移载体pUC18-US10-VP2质粒。将质粒与CVI988/Rispens疫苗毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过免疫荧光方法筛选,结果获得了表达VP2基因的重组MDV(rMDV-VP2)。用IBDV特异性单克隆抗体进行间接免疫荧光试验(IFA)证实,rMDV-VP2病毒传至第8代仍能稳定表达VP2蛋白,这为进一步研究其免疫学特性奠定了基础。
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关 键 词: | 马立克氏病毒(Marek’s disease virus MDV) 转移载体 重组病毒 VP2 |
收稿时间: | 2005-11-10 |
修稿时间: | 2006-01-20 |
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