| 鹅细小病毒vp基因片段的原核表达及抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 邵昱昊,王静,王懂帅,韩宗玺,刘胜旺,冉多良,孔宪刚.鹅细小病毒vp基因片段的原核表达及抗血清的制备[J].Virologica Sinica,2006,21(6):581-584. |
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| 作者姓名： | 邵昱昊 王静 王懂帅 韩宗玺 刘胜旺 冉多良 孔宪刚 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室 黑龙江哈尔滨150001(卲昱昊，韩宗玺，刘胜旺，孔宪刚)，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室 黑龙江哈尔滨150001新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052(王静)，甘肃省商业科技研究院 甘肃兰州730020(王懂帅)，新疆农业大学动物医学学院 乌鲁木齐830052(冉多良) |
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| 摘 要： | 以鹅细小病毒(Gooseparvovirus,GPV)HG5/82株基因组作为PCR反应模板,扩增vp基因3’端长864bp的基因片段,将其克隆到pMD18-TSimple克隆载体后转化入大肠杆菌TG1。筛选阳性质粒,并通过BamHⅠ和HindⅢ将外源基因定向克隆到原核表达载体pET-30a,阳性重组质粒经确证性序列测定,证明外源片断插入到pET-30a的预期位置。将其转入大肠杆菌BL21,经终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,SDS-PAGE表明外源基因获得表达,融合蛋白分子量约为34kDa。将诱导后的工程菌用6mol/L盐酸胍裂解,经超声处理后离心,利用镍离子亲和树脂对裂解产物的上清进行纯化。用纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔制备兔抗该融合蛋白的抗血清。Westernblotting结果表明制备的兔抗血清与该融合蛋白及亲本病毒的结构蛋白都具有反应性。结合前期工作进展对GPVVP蛋白的B细胞线性抗原表位进行定位。
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| 关 键 词： | 鹅细小病毒 vp基因片断 原核表达 抗血清 |
| 收稿时间： | 2006-05-30 |
| 修稿时间： | 2006-09-01 |
Prokaryotic Expression of vp3 Gene Fragment from Goose Parvovirus and Preparation of an Antiserum |
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| SHAO Yu-hao, WANG Jing, WANG Dong-shuai, HAN Zong-xi, LIU Sheng-wang,RAN Duo-liang, KONG Xian-gang.Prokaryotic Expression of vp3 Gene Fragment from Goose Parvovirus and Preparation of an Antiserum[J].中国病毒学(英文版),2006,21(6):581-584. |
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| Authors: | SHAO Yu-hao WANG Jing WANG Dong-shuai HAN Zong-xi LIU Sheng-wang RAN Duo-liang KONG Xian-gang |
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| Institution: | 1.Division of Avian Infectious Diseases, National Laboratory of Veterinary Biotechnology, Institute of Harbin Veterinary Medicine, CAAS, Haerbin 150001, China; 2. College of Veterinary Medicine, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China; 3. Institute of Gansu Trade Technology, Lanzhou 730020, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Goose parvovirus Fragment of vp gene Prokaryotic expression Antiserum |
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