| 猪瘟病毒E2蛋白A／D抗原区基因在酵母中的分泌表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 徐学清,张素芳,郑其升,苏小运,任雪枫,陈溥言.猪瘟病毒E2蛋白A／D抗原区基因在酵母中的分泌表达与鉴定[J].Virologica Sinica,2004,19(6):598-601. |
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| 作者姓名： | 徐学清 张素芳 郑其升 苏小运 任雪枫 陈溥言 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095
(徐学清，张素芳，郑其升，苏小运，任雪枫)，南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095(陈溥言) |
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| 基金项目： | 国家 863 高技术发展计划资助项目(2001AA249012)。 |
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| 摘 要： | 基于猪瘟病毒主要保护性抗原E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位-B／C抗原区和A／D抗原区，设计一对特异性的引物扩增猪瘟病毒E2蛋白的A／D抗原区基因，并将PCR产物克隆入含有强启动子PAOX1和α-MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαC中，构建成重组质粒pPICZα-AD，酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母X33菌中，经Zeocin^TM筛选得到5株高拷贝转化子，甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Western blot试验表明酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的E2蛋白，蛋白表达量达175．8μg／mL。N-糖基化分析显示该表达蛋白在分泌过程中发生糖基化。该研究为研制防治猪瘟的亚单位疫苗与诊断试剂盒奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 A／D抗原区 毕赤酵母 表达 |
Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 A/D Antigenic Domain in Pichia pastoris and Identification of the Protein |
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| XU Xue-qing,ZHANG Su-fang,ZHENG Qi-sheng,SU Xiao-yun,REN Xue-feng,CHEN Pu-yan.Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 A/D Antigenic Domain in Pichia pastoris and Identification of the Protein[J].中国病毒学(英文版),2004,19(6):598-601. |
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| Authors: | XU Xue-qing ZHANG Su-fang ZHENG Qi-sheng SU Xiao-yun REN Xue-feng CHEN Pu-yan |
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| Institution: | XU Xue-qing1,ZHANG Su-fang1,ZHENG Qi-sheng1,SU Xiao-yun1,REN Xue-feng1,CHEN Pu-yan1** |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CSFV A/D antigenic domain Pichia pastoris Expression |
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