| 乙型脑炎病毒SA14—14—2株E蛋白主要抗原片段的高效表达 |
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| 引用本文： | 葛菲菲,邱亚峰,杨耀武,陈溥言.乙型脑炎病毒SA14—14—2株E蛋白主要抗原片段的高效表达[J].Virologica Sinica,2005,20(2):117-120. |
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| 作者姓名： | 葛菲菲 邱亚峰 杨耀武 陈溥言 |
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| 作者单位： | [1]南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，江苏南京210095 [2]中国预防医学科学院病毒研究所，北京100052 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30340013)，广东省科技攻关项目(532014202028) |
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| 摘 要： | 在本实验室已构建的原核表达载体(含乙脑疫苗株SA14-14-2株E蛋白基因主要抗原片段)的基础上用巴斯德毕赤酵母系统表达,该片段长1113bp,编码371个氨基酸残基,将其亚克隆入酵母表达载体pPICZα-A,以电穿孔法转化酵母X-33,用Zeocin平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物.由于糖基化不同,所表达产物有两种,其相对分子质量分别为44kDa和50kDa,表达量较高,约为290mg/L,经Western印迹验证,有较好的抗原性.在ELISA试验中,我们直接以PBS透析后的酵母上清包被,能够很明显地区分出乙脑阴阳性血清,与RT-PCR检测的相符率达95%,为制备JEV的诊断抗原和基因工程疫苗提供了依据.
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| 关 键 词： | 乙脑疫苗株SA14—14—2株 E蛋白基因主要抗原片段 巴斯德毕赤酵母 高效表达 |
High Level Expression of Major Antigenic Segment of Japanese Encephalitis Virus Strain SA 14-14-2 E Protein |
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| GE Fei-fei,QIU Ya-feng,YANG Yao-wu,CHEN Pu-yan.High Level Expression of Major Antigenic Segment of Japanese Encephalitis Virus Strain SA 14-14-2 E Protein[J].中国病毒学(英文版),2005,20(2):117-120. |
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| Authors: | GE Fei-fei QIU Ya-feng YANG Yao-wu CHEN Pu-yan |
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| Institution: | GE Fei-fei~1,QIU Ya-feng~1,YANG Yao-wu~2,CHEN Pu-yan~ |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Japanese Encephalitis virus SA 14-14-2 strain Major antigenic segment of E protein Pichia pastoris High expression |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
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