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SARS病毒核蛋白基因的克隆及其表达研究
引用本文:陆群英,卢亦愚,姚苹苹,徐芳,葛琼,翁景清,严菊英,龚黎明,施雯,赵芝雅,朱智勇,朱函坪.SARS病毒核蛋白基因的克隆及其表达研究[J].Virologica Sinica,2003,18(5):451-453.
作者姓名:陆群英  卢亦愚  姚苹苹  徐芳  葛琼  翁景清  严菊英  龚黎明  施雯  赵芝雅  朱智勇  朱函坪
作者单位:浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所,浙江省疾病预防控制中心病毒研究所 浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009,浙江杭州 310009
摘    要:从一例输入性传染性非典型性肺炎病人血清中提取病毒RNA,通过RT—PCR方法扩增出SARS病毒核蛋白基因片段,克隆入质粒载体pUCm—T后,进行核苷酸序列的测定及分析,与已公布的SARS病毒基因序列进行比较,证实为SARS冠状病毒核蛋白基因。为了解该病毒核蛋白的抗原特性,将核蛋白基因插入表达载体,构建重组质粒pET28a—SN,转导大肠杆菌BL21(DE3)后,加IPTG诱导表达。产物经SDS—PAGE电泳分析,表达出相对分子量约为50kDa的蛋白,占整个菌体的45%左右。Westem—blot分析表明,表达产物仅与SARS阳性病人血清起反应,而与正常血清不起反应。间接ELISA免疫检测,抗原滴度达1:12500。表明表达的核蛋白为SARS特异性抗原,这为SARS病毒的诊断试剂的研制提供了方便而安全的抗原来源。

关 键 词:SARS病毒  核蛋白基因  克隆  表达  严重急性呼吸综合征

Cloning and Expression of Nucleocapsid Protein Gene of SARS Associated Coronavirus
ZHU Han-ping,LU Qun-ying,LU Yi-yu,YAO Ping-ping,XU Fang,GE Qong,WENG Jing-qing,YAN Ju-ying,GONG Li-ming,SHI Wen,ZHAO Zhi-ya,ZHU Zhi-yong.Cloning and Expression of Nucleocapsid Protein Gene of SARS Associated Coronavirus[J].中国病毒学(英文版),2003,18(5):451-453.
Authors:ZHU Han-ping  LU Qun-ying  LU Yi-yu  YAO Ping-ping  XU Fang  GE Qong  WENG Jing-qing  YAN Ju-ying  GONG Li-ming  SHI Wen  ZHAO Zhi-ya  ZHU Zhi-yong
Abstract:
Keywords:SARS-associated coronavirus(SARS-CoV)  Nucleocapsid gene  Sequence analysis  Protein expression  Antigen
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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