| 乙型肝炎病毒全长PreS蛋白基因在酵母中的表达 |
| |
| 引用本文： | 孙明颢,叶林伯,郜金荣,贺石汉,吴正辉.乙型肝炎病毒全长PreS蛋白基因在酵母中的表达[J].Virologica Sinica,2003,18(2):99-103. |
| |
| 作者姓名： | 孙明颢 叶林伯 郜金荣 贺石汉 吴正辉 |
| |
| 作者单位： | 武汉大学生命科学院病毒研究所，武汉大学生命科学院病毒研究所，武汉大学生命科学院病毒研究所，武汉大学生命科学院病毒研究所，武汉大学生命科学院病毒研究所 湖北武汉，430072，湖北武汉，430072，湖北武汉，430072，湖北武汉，430072，湖北武汉，430072 |
| |
| 基金项目： | 武汉市攻关项目(20026002091) |
| |
| 摘 要： | 应用直接提取法从武汉地区乙型肝炎病人患者阳性血清中提取HBV基因组，以此作为模板，用引物PCR方法获得全长preS基因，该片段的DNA大小1203bp-克隆到pUCm-T载体中，应用M13通用引物进行序列测定，与中国HBV标准株序列比较，证实基因型为Adr亚型。有24个核苷酸不同，preS基因包含3个起始密码ATG分别为preS1，preS2，和S的翻译起点。然后将preS基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K中，将Sal Ⅰ线性化的pPIC9K—preS质粒用电击法导入巴斯德一毕赤酵母GS115His中。通过MD—G418平板筛选和5‘‘‘‘‘‘‘‘AOXI和3’AOXI引物PCR鉴定获得稳定重组HBV全长严preS基因的His^ Mut^ 酵母工程菌株。此酵母菌株在合适的培养条件和甲醇诱导下高效表达产生全长preS蛋白并可分泌到培养液中，SDS—PAGE显示培养液中含有分子量约为48kDa的带；微孔ELISIA法证实表达并分泌到培养液中的preS蛋白能够与HBV抗体阳性血清发生特异性反应。
|
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 全长PreS蛋白基因 Adr亚型 疫苗 毕赤酵母表达系统 |
Expression of the Full Length preS Gene of Hepatitis B virus in Pichia pastoris |
| |
| SUN Ming-hao,YE Lin-bai,GAO Jin-rong,HE Shi-han,WU Zheng-hui.Expression of the Full Length preS Gene of Hepatitis B virus in Pichia pastoris[J].中国病毒学(英文版),2003,18(2):99-103. |
| |
| Authors: | SUN Ming-hao YE Lin-bai GAO Jin-rong HE Shi-han WU Zheng-hui |
| |
| Institution: | SUN Ming-hao,YE Lin-bai**,GAO Jin-rong,HE Shi-han,WU Zheng-hui |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | preS gene Pichia pastoris ELISA |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
