| 伪狂犬病毒蛋白激酶基因的PCR扩增及其克隆鉴定 |
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| 引用本文： | 罗满林 丁建华. 伪狂犬病毒蛋白激酶基因的PCR扩增及其克隆鉴定[J]. Virologica Sinica, 1996, 11(4): 360-364 |
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| 作者姓名： | 罗满林 丁建华 |
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| 作者单位： | 武汉大学病毒系 |
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| 摘 要： | 以ＢＨＫ－２１细胞单层上增殖的伪狂犬病毒（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ），经离心浓缩后，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ消化法分离纯化ＰＲＶ基因组ＤＮＡ。参照ＰＲＶＫａ株和ＮＩＡ－３株蛋白激酶（ＰＫ）基因的ＤＮＡ序列，设计并合成了一对长度为２６ｂｐ和３２ｂｐ的引物，以纯化的ＰＲＶ基因组ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ技术成功地扩增出我国伪狂犬病毒地方株的ＰＫ基因，并将它克隆于ｐＵＣ１９载体。酶切分析结果表明，所获ＰＫ基因克隆在ＰｓｔＩ、ＳｍａＩ、ＸｈｏＩ和ＳａｌＩ上的切点与ＰＲＶＮＩＡ－３株相同。为下一步进行ＰＫ基因的体外缺失和重组，以构建减毒的ＰＫ缺失疫苗株奠定了基础。
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒，蛋白激酶基因，PCR扩增，基因克隆 |
Amplifiction and Cloning of Protein Kinase Gene of Pseudorabies Virus by PCR |
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| Luo Manlin, Ding Jianhua, Wang Jiafu, Zhang Chuyu. Amplifiction and Cloning of Protein Kinase Gene of Pseudorabies Virus by PCR[J]. 中国病毒学(英文版), 1996, 11(4): 360-364 |
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| Authors: | Luo Manlin Ding Jianhua Wang Jiafu Zhang Chuyu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pseudorabies virus Protein kinase gene PCR amplification Gene clone |
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