甘露糖正向筛选体系在巨尾桉遗传转化中的应用 |
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引用本文: | 张乐,庞涛,夏新莉.甘露糖正向筛选体系在巨尾桉遗传转化中的应用[J].生物学杂志,2014(4):64-67. |
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作者姓名: | 张乐 庞涛 夏新莉 |
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作者单位: | 北京林业大学生物科学与技术学院,北京100083 |
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基金项目: | 国家“十二五”科技支撑课题(2011BAD38B01) |
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摘 要: | 为了研究甘露糖正向筛选体系在巨尾桉遗传转化过程中的有效性,构建了以6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)为筛选标记的pCAMBIA1301植物表达载体,并将该载体通过农杆菌介导的遗传转化转入木本植物巨尾桉中。将获得的阳性植株通过氯酚红(chlorophenol red,CPR)法及PCR检测,桉树遗传转化的阳性率达到26.09%。另外,通过正交试验优化法,对巨尾桉组培快繁体系建立过程中不同浓度激素配比进行了研究,建立起良好的巨尾桉组织培养再生体系,由甘露糖筛选敏感性测试,获得了巨尾桉筛选临界浓度,蔗糖与甘露糖比例为19∶11,优化了巨尾桉遗传转化体系,为今后巨尾桉组织培养与遗传转化研究提供了重要的参考依据。
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关 键 词: | 磷酸甘露糖异构酶(PMI) 正向筛选体系 遗传转化 巨尾桉 |
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