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花鲈Wap65-2基因的克隆、理化性质及其表达与哈维氏弧菌感染的相关性
引用本文:史雨红,陈炯,高姗姗,沈广强,陆新江,李明云.花鲈Wap65-2基因的克隆、理化性质及其表达与哈维氏弧菌感染的相关性[J].动物学研究,2012,33(5):481-486.
作者姓名:史雨红  陈炯  高姗姗  沈广强  陆新江  李明云
作者单位:宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室
基金项目:教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-08-0928);浙江省自然科学基金(Y3110053);宁波市自然科学基金(2010A610006);中央财政支持地方高校发展专项(xkc11005)
摘    要:Wap65-2(warm temperature acclimation related 65 kDa protein-2)是鱼类中发现的一种血浆糖蛋白,与细菌感染性免疫应激紧密相关。该研究首次克隆了花鲈Wap65-2基因全长cDNA序列。它由1601个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,预期编码一个由436个氨基酸组成、相对分子质量为4.87×104的前体蛋白,N端19个残基为信号肽序列。序列和系统进化树分析表明,花鲈Wap65-2与欧洲海鲈进化关系最近,两者氨基酸同源性高达80.7%。健康花鲈Wap65-2基因mRNA主要在肝中表达,心和肌肉中少量表达。qRT-PCR分析揭示,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染感染12h后,花鲈肝中Wap65-2基因mRNA表达显著上调,24h时达到峰值,为健康对照的6.89倍。原核表达花鲈Wap65-2并制备抗血清。Western blot分析表明,哈维氏弧菌感染12h后,花鲈血清中Wap65-2含量显著增加,36h时达到最大值,为健康对照的5.33倍。综上所述,花鲈Wap65-2基因的表达与其细菌感染性免疫应激紧密相关。

关 键 词:Wap65-2基因  花鲈  哈维氏弧菌  实时荧光定量PCR  Western  blot

Cloning,physical and chemical property analysis of the Japanese sea bass Wap65-2 gene and its expression following Vibrio harveyi infection
SHI Yu-Hong,CHEN Jiong,GAO Shan-Shan,SHEN Guang-Qiang,LU Xin-Jiang,LI Ming-Yun.Cloning,physical and chemical property analysis of the Japanese sea bass Wap65-2 gene and its expression following Vibrio harveyi infection[J].Zoological Research,2012,33(5):481-486.
Authors:SHI Yu-Hong  CHEN Jiong  GAO Shan-Shan  SHEN Guang-Qiang  LU Xin-Jiang  LI Ming-Yun
Institution:(Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology,Ministry of Education,Ningbo University,Ningbo 315211,China)
Abstract:
Keywords:
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