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铜绿假单胞菌表面(氧化)低密度脂蛋白配体的研究
引用本文:李雨欣,刘治,杨金丽,韩润林.铜绿假单胞菌表面(氧化)低密度脂蛋白配体的研究[J].微生物学通报,2019,46(10):2689-2696.
作者姓名:李雨欣  刘治  杨金丽  韩润林
作者单位:1 内蒙古农业大学生命科学学院 内蒙古 呼和浩特 010018;3 内蒙古农业大学血浆脂蛋白免疫学研究中心 内蒙古 呼和浩特 010018,1 内蒙古农业大学生命科学学院 内蒙古 呼和浩特 010018;3 内蒙古农业大学血浆脂蛋白免疫学研究中心 内蒙古 呼和浩特 010018,2 内蒙古农业大学兽医学院 内蒙古 呼和浩特 010018,2 内蒙古农业大学兽医学院 内蒙古 呼和浩特 010018;3 内蒙古农业大学血浆脂蛋白免疫学研究中心 内蒙古 呼和浩特 010018
摘    要:【背景】研究发现铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)与(氧化)低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL/oxidized low density lipoprotein,ox LDL)具有特异性相互作用,有报道证实P. aeruginosa表达的Rah U蛋白可以与LDL/ox LDL特异性结合。【目的】验证Rah U蛋白是否是P.aeruginosa表面主要的LDL/ox LDL配体。【方法】大肠杆菌表达Rah U蛋白(r Rah U),ELISA验证r Rah U与LDL/ox LDL的相互作用。利用同源重组的方法构建RahU基因缺失突变株(ΔRahU菌株)作为阴性对照菌株,制备小鼠抗r Rah U抗体,经WesternBlot及ELISA分别检测抗r Rah U抗体与P.aeruginosa野生型菌株膜蛋白中RahU蛋白及菌体表面RahU蛋白的结合。通过ELISA方法对P. aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株与LDL/ox LDL的结合差异进行比较,并对不同蛋白酶水解ΔRahU菌体表面蛋白后ΔRahU菌株与LDL/ox LDL结合能力的差异进行比较。【结果】经ELISA验证rRahU与LDL/oxLDL存在特异性结合。Western Blot及ELISA方法证实小鼠抗rRahU抗体可以与P. aeruginosa野生型菌株膜蛋白中RahU蛋白及菌体表面RahU蛋白特异性结合,而不与ΔRahU菌株相互作用。P.aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株与LDL/oxLDL结合能力无显著差异,且蛋白酶水解后ΔRahU菌株与LDL/oxLDL的结合能力相近。【结论】RahU蛋白是P. aeruginosa表面的LDL/oxLDL配体之一,但不是唯一的配体。

关 键 词:铜绿假单胞菌,低密度脂蛋白/氧化低密度脂蛋白,RahU蛋白,配体

Detection of (oxidized) low-density lipoprotein binding ligand on Pseudomonas aeruginosa
LI Yu-Xin,LIU Zhi,YANG Jin-Li and HAN Run-Lin.Detection of (oxidized) low-density lipoprotein binding ligand on Pseudomonas aeruginosa[J].Microbiology,2019,46(10):2689-2696.
Authors:LI Yu-Xin  LIU Zhi  YANG Jin-Li and HAN Run-Lin
Institution:1 College of Life Sciences, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China;3 Research Center of Plasma Lipoprotein Immunology, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China,1 College of Life Sciences, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China;3 Research Center of Plasma Lipoprotein Immunology, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China,2 College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China and 2 College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China;3 Research Center of Plasma Lipoprotein Immunology, Inner Mongolia Agriculture University, Hohhot, Inner Mongolia 010018, China
Abstract:
Keywords:Pseudomonas aeruginosa  low density lipoprotein/oxidized low density lipoprotein  RahU protein  ligand
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