| 产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及酶学特性分析 |
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| 引用本文： | 王艳君,卓少玲,陈盛,杨谦.产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及酶学特性分析[J].微生物学通报,2012,39(12):1734-1745. |
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| 作者姓名： | 王艳君 卓少玲 陈盛 杨谦 |
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| 作者单位： | 1. 福建师范大学 福清分校生化系 福建 福清 350300;2. 哈尔滨工业大学 生命科学与工程系 黑龙江 哈尔滨 150001 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金项目(No. 2010J05056); 福建省教育厅科技项目(No. JB10201) |
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| 摘 要： | 【目的】利用筛选培养基,从福建沿海潮间带泥样中分离筛选产壳聚糖酶的菌株,并研究菌株的产酶特性。【方法】通过形态学观察,结合26S rDNA序列进行分类鉴定,采用DNS法测定酶活力。【结果】筛选得到产壳聚糖酶的菌株KQ-1002与草酸青霉(Penicillium oxalicum)的同源性为99%,并初步鉴定为青霉属的一种。发酵培养的最适温度为30°C,最适碳源为1.0%水溶性壳聚糖,最适氮源为1.87%(NH4)2SO4,最适pH为6.0。该菌株液体发酵培养72 h产壳聚糖酶活性最高,经优化后最高产酶量为18 U/mL。纯化后的壳聚糖酶经SDS-PAGE分析其分子量约40 kD。酶促反应最适pH为5.0,最适反应温度为55°C,Km值为1.293 g/L。在离子浓度为1.0×10 3mol/L时,金属离子Cu2+、Hg2+、Ag+对酶的活性均有强烈的抑制作用。壳聚糖酶对不同底物及脱乙酰度的壳聚糖具有不同的降解作用。【结论】筛选获得产壳聚糖酶的真菌菌株KQ-1002的壳聚糖酶活力经优化后提高了约7倍,是一株具有研究和应用潜力的产壳聚糖酶菌株。
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| 关 键 词： | 壳聚糖酶 26S rDNA鉴定 产酶条件 酶学特性 |
Screening, identification and enzymatic properties of chitosanase-producing strain |
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| WANG Yan-Jun,ZHUO Shao-Ling,CHEN Sheng and YANG Qian.Screening, identification and enzymatic properties of chitosanase-producing strain[J].Microbiology,2012,39(12):1734-1745. |
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| Authors: | WANG Yan-Jun ZHUO Shao-Ling CHEN Sheng and YANG Qian |
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| Institution: | 1. Fuqing Branch of Fujian Normal University, Fuqing, Fujian 350300, China;2. Department of Life Science and Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin, Heilongjiang 150001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Chitosanase 26S rDNA Fermentation conditions Enzymatic properties |
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