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半合成抗体库的构建及抗Tie2 Fab抗体的筛选
引用本文:廖振林,侯利华,李建民,陈薇,童贻刚,王臣,王慧春,安小平.半合成抗体库的构建及抗Tie2 Fab抗体的筛选[J].微生物学通报,2004,31(6):37-41.
作者姓名:廖振林  侯利华  李建民  陈薇  童贻刚  王臣  王慧春  安小平
作者单位:1. 军事医学科学院流行病与微生物学研究所,北京,100071
2. 西北农林大学,杨凌,712100
3. 佳木斯大学医学院,佳木斯,154007
基金项目:北京市自然科学基金资助项目 (No 5 0 2 2 0 1 2 )
摘    要:构建一个半合成抗体库 ,不经免疫制备人源抗Tie2Fab抗体。通过RT PCR方法 ,从人脐带血淋巴细胞总RNA扩增轻链基因及重链VH段基因 ,将轻链基因插入pCOMb3载体中 ,得人轻链质粒库 ;从HBsAb的Fd段基因制备含有不同长度随机化CDR3的FR3 CDR3 J CH1片段 ,然后将VH段基因与随机化的CDR3融合 ,得到Fd基因片段 ,再将其插入轻链质粒库中 ,得半合成人Fab质粒库。通过多次建库 ,获得总容量为 2× 1 0 7的半合成抗体库。其Fd段和轻链基因的重组率为 5 0 %。经 3轮淘洗 ,从噬菌体抗体库中筛选到与Tie2抗原特异结合的噬菌体克隆。测序确定抗体基因序列

关 键 词:噬菌体抗体库  Tie2  Fab
文章编号:0253-2654(2004)06-0037-05
修稿时间:2004年1月19日

Construction of a Semi-synthetic Antibody Library and Screening Anti-Tie2 Fab Antibody
LIAO Zhen-Lin,HOU Li-Hua,LI Jian-Min,CHEN Wei,TONG Yi-Gang.Construction of a Semi-synthetic Antibody Library and Screening Anti-Tie2 Fab Antibody[J].Microbiology,2004,31(6):37-41.
Authors:LIAO Zhen-Lin  HOU Li-Hua  LI Jian-Min  CHEN Wei  TONG Yi-Gang
Institution:LIAO Zhen-Lin 1 HOU Li-Hua 1 LI Jian-Min 1 CHEN Wei 1 TONG Yi-Gang 1**
Abstract:
Keywords:Phage display  Tie2  Fab
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