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苏云金芽胞杆菌Sigma K在大肠杆菌中的表达与纯化
引用本文:杨敏,彭琦,黄闽忠,考桂伟,张杰,宋福平.苏云金芽胞杆菌Sigma K在大肠杆菌中的表达与纯化[J].微生物学通报,2016,43(1):69-75.
作者姓名:杨敏  彭琦  黄闽忠  考桂伟  张杰  宋福平
作者单位:1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193,1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193,1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;2. 东北农业大学生命科学学院 黑龙江 哈尔滨 150030,1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193,1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193,1. 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 31270111,31300085)
摘    要:【目的】在大肠杆菌中表达纯化苏云金芽胞杆菌HD73的转录调控因子Sigma K(σK)。【方法】PCR扩增出苏云金芽胞杆菌HD73中sig K基因的ORF(Open reading frame)装载到带有His标签的表达载体p ET21b上,转入到表达菌株BL21(DE3)中获得重组菌株BL21(p ETsig K),通过SDS-PAGE、镍柱亲和纯化、阴离子交换纯化和凝胶迁移实验(EMSA)等方法对Sigma K蛋白进行提取、纯化和生物活性分析。【结果】正确表达出大小约为27 k D的His-Sigma K蛋白,并获得了纯化的蛋白。EMSA结果表明纯化的His-Sigma K蛋白可以与受其控制的cry1Ac基因启动子结合。【结论】表达和纯化了His-Sigma K蛋白,His-Sigma K具有与受其控制的启动子结合的功能。

关 键 词:苏云金芽胞杆菌,Sigma  K蛋白,生物活性,转录调控

Expression and purification of Bacillus thuringiensis Sigma K in Escherichia coli
YANG Min,PENG Qi,HUANG Min-Zhong,KAO Gui-Wei,ZHANG Jie and SONG Fu-Ping.Expression and purification of Bacillus thuringiensis Sigma K in Escherichia coli[J].Microbiology,2016,43(1):69-75.
Authors:YANG Min  PENG Qi  HUANG Min-Zhong  KAO Gui-Wei  ZHANG Jie and SONG Fu-Ping
Institution:1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China,1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China,1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;2. College of Life Sciences, Northeast Agricultural University, Harbin, Heilongjiang 150030, China,1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China,1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China and 1. State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, nstitute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:
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