| 天冬氨酸提高乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000酸胁迫抗性的作用机制 |
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| 引用本文： | 张彦位,张娟,堵国成,陈坚.天冬氨酸提高乳酸乳球菌Lactococcus lactis NZ9000酸胁迫抗性的作用机制[J].微生物学通报,2018,45(12):2563-2575. |
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| 作者姓名： | 张彦位 张娟 堵国成 陈坚 |
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| 作者单位： | 1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122；2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122；2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122；3. 江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122,2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122；4. 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室 江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31470160)；江苏省产学研前瞻性联合研究项目(BY2016022-39) |
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| 摘 要： | 【背景】乳酸菌作为重要的发酵微生物在应用过程中面临广泛存在的酸胁迫。【目的】确认天冬氨酸可有效提高乳酸乳球菌的酸胁迫抗性,通过解析天冬氨酸的作用机制,为进一步提高乳酸菌酸胁迫抗性提供可借鉴的思路。【方法】通过荧光定量PCR比较胁迫条件下天冬氨酸对L.lactisNZ9000产能和氨基酸代谢途径中关键基因转录水平的影响,并通过过量表达天冬酰胺酶增加胞内天冬氨酸的含量。【结果】天冬氨酸主要是在转氨酶的作用下生成草酰乙酸和谷氨酸。草酰乙酸参与三羧酸循环,为细胞提供更多的能量;谷氨酸经谷氨酸脱羧酶途径提高细胞的酸胁迫抗性。经pH4.0胁迫处理后,天冬氨酸使糖酵解和三羧酸循环产能途径中关键基因转录上调,胞内ATP含量为对照组的42倍;胞内谷氨酸含量为对照的1.99倍。通过过量表达天冬酰胺酶获得的重组菌株,在pH3.6条件下胁迫0.5h后,存活率约为对照组的11.11倍。【结论】在L. lactis NZ9000中探究了天冬氨酸提高酸胁迫抗性的作用机理,进一步完善了氨基酸代谢提高乳酸菌酸胁迫抗性的理论基础。
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| 关 键 词： | Lactococcus lactis NZ9000，天冬氨酸，酸胁迫，荧光定量PCR，天冬酰胺酶 |
Improvement of acid-tolerance of Lactococcus lactis NZ9000 by aspartate |
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| ZHANG Yan-Wei,ZHANG Juan,ZHANG Yan-Wei and CHEN Jian.Improvement of acid-tolerance of Lactococcus lactis NZ9000 by aspartate[J].Microbiology,2018,45(12):2563-2575. |
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| Authors: | ZHANG Yan-Wei ZHANG Juan ZHANG Yan-Wei and CHEN Jian |
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| Institution: | 1. Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,1. Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China,2. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 3. Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China and 2. School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 4. National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lactococcus lactis NZ9000 aspartate acid stress fluorescence quantitative PCR L-asparaginase |
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