| 稳定表达禽β防御素6的DF-1细胞系的建立及其抑菌活性 |
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| 引用本文： | 涂健,李芳果,李怡彤,殷冬冬,邵颖,宋祥军,祁克宗.稳定表达禽β防御素6的DF-1细胞系的建立及其抑菌活性[J].微生物学通报,2021,48(3):778-786. |
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| 作者姓名： | 涂健 李芳果 李怡彤 殷冬冬 邵颖 宋祥军 祁克宗 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室 安徽 合肥 230036 |
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| 基金项目： | 安徽高校协同创新项目(GXXT-2019-035)；国家自然科学基金(31502038，31972644) |
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| 摘 要： | 【背景】禽β防御素6是禽体内分泌的一类抗菌肽,在抵抗病原入侵和免疫调节中发挥着重要作用,但其常规表达方式效率较低,难以在产业化生产中加以应用。【目的】建立稳定表达AvBD6的细胞系,并检测其表达产物对耐药大肠杆菌的抗菌活性,为其他防御素表达提供参考。【方法】利用显微镜观察构建真核重组表达载体pLOV-eGFP-AvBD6转染至293T细胞后的转染效率;收集293T细胞上清液并感染DF-1细胞,通过嘌呤霉素加压筛选稳定表达株;利用RT-PCR和Western Blot分别检测目的基因在转录水平和蛋白水平的表达情况;利用扫描电镜观察细胞培养上清液对耐药大肠杆菌的抗菌效果及其对菌体的损伤。【结果】成功构建重组表达载体pLOV-eGFP-AvBD6,筛选出稳定表达AvBD6的DF-1细胞系,而且目的基因在转录水平和蛋白水平均有表达;细胞培养上清显著降低大肠杆菌和副伤寒沙门菌存活率,对金黄色葡萄球菌的抗菌活性较低。【结论】建立了稳定表达AvBD6的DF-1细胞系,其表达产物对耐药大肠杆菌具有良好的抗菌效果,对推动防御素的应用提供技术支持。
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| 关 键 词： | 禽 β 防御素 6 DF-1 细胞 稳定表达 抗菌活性 |
Establishment of DF-1 cell lines with stable expression of avianβ-defensin 6 and its antimicrobial activity |
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| TU Jian,LI Fangguo,LI Yitong,YIN Dongdong,SHAO Ying,SONG Xiangjun,QI Kezong.Establishment of DF-1 cell lines with stable expression of avianβ-defensin 6 and its antimicrobial activity[J].Microbiology,2021,48(3):778-786. |
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| Authors: | TU Jian LI Fangguo LI Yitong YIN Dongdong SHAO Ying SONG Xiangjun QI Kezong |
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| Institution: | Anhui Province Key Laboratory of Veterinary Pathobiology and Disease Control, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avianβ-defensin 6 DF-1 cells stable expression antimicrobial activity |
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