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亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白的提纯及性质
引用本文:张琪,程显好,郭文娟,刘凤红,王朝霞.亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白的提纯及性质[J].微生物学通报,2014,41(6):1035-1042.
作者姓名:张琪  程显好  郭文娟  刘凤红  王朝霞
作者单位:1. 天津工业大学 天津 300000;1. 天津工业大学 天津 300000;1. 天津工业大学 天津 300000;2. 鲁东大学 菌物科学与技术研究院 山东 烟台 264025;2. 鲁东大学 菌物科学与技术研究院 山东 烟台 264025
基金项目:山东省自然科学基金联合专项项目(No. ZR2010CL005);烟台市科技发展计划项目(No. 2011069)
摘    要:【目的】探讨锌离子诱导亚香棒虫草(Cordyceps hawkesii)菌丝体金属硫蛋白的产生及性质。【方法】亚香棒虫草菌丝体以18 g/L Zn2+在10 L发酵罐中诱导培养64 h后收集菌丝体,产率为每升发酵液收集12.2 g菌丝体(干重),细胞破碎取上清液通过2次凝胶柱层析,冷冻干燥得到亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白纯品。利用考马斯亮蓝法(Bradford法)进行含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT含量,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得巯基含量和结合锌原子数,用电喷雾质谱仪测得分子量,全自动氨基酸分析仪测氨基酸组成。通过对羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率试验探讨亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性。【结果】发酵终点金属硫蛋白产量为15.3 mg/g菌丝体湿重。金属硫蛋白的分子量为7 680 Da,每分子蛋白质含有18个巯基、结合4个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含60个氨基酸,其中含有15个半胱氨酸,且含有组氨酸和芳香族氨基酸。亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性稍强于谷胱甘肽,弱于动物金属硫蛋白。【结论】亚香棒虫草在Zn2+胁迫下能够大量合成金属硫蛋白,且其金属硫蛋白的性质与哺乳动物金属硫蛋白有相似性。

关 键 词:亚香棒虫草菌丝体,金属硫蛋白,锌诱导,氨基酸组成,抗氧化活性

Purification and characterization of metallothionein in Cordyceps hawkesii mycelia
ZHANG Qi,CHENG Xian-Hao,GUO Wen-Juan,LIU Feng-Hong and WANG Zhao-Xia.Purification and characterization of metallothionein in Cordyceps hawkesii mycelia[J].Microbiology,2014,41(6):1035-1042.
Authors:ZHANG Qi  CHENG Xian-Hao  GUO Wen-Juan  LIU Feng-Hong and WANG Zhao-Xia
Institution:1. Tianjin Polytechnic University, Tianjin 300000, China;1. Tianjin Polytechnic University, Tianjin 300000, China;1. Tianjin Polytechnic University, Tianjin 300000, China;2. Institute of Fungi Science and Technology Research, Ludong University, Yantai, Shandong 264025, China;2. Institute of Fungi Science and Technology Research, Ludong University, Yantai, Shandong 264025, China
Abstract:
Keywords:Cordyceps hawkesii mycelia  Zn-metallothionein  Zinc induced  Amino acid composition  Antioxidant activity
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