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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立与临床应用
引用本文:刘忠华,余兴龙,李润成,黄泽彬,廖立珊,白 霞,李 晶,向卫军,汪镇南,丁 建.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立与临床应用[J].微生物学通报,2008,35(8):1268-1272.
作者姓名:刘忠华  余兴龙  李润成  黄泽彬  廖立珊  白 霞  李 晶  向卫军  汪镇南  丁 建
作者单位:湖南农业大学动物医学院,长沙,410128
基金项目:湖南省科技专项基金,湖南农业大学校科研和教改项目
摘    要:根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因的缺失信息,设计了3条特异性引物,以含高致病性PRRSV Nsp2基因的质粒pMDNSP2及普通PRRSV VR2332株RNA为模板,建立了快速诊断高致病性PRRSV RT-PCR方法.通过对临床组织病料的总RNA进行不同稀释倍数检测,结果表明该方法能从0.265 pg的总RNA中检测到PRRSV的基因,说明敏感性高.用该方法对猪瘟病毒(CSFV)、Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)、伪狂犬病病毒(PRV),链球菌(Streptococcus)、副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)和大肠杆菌(Escherichia coli)同条件检测,结果都为阴性.进一步对36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料细胞培养物、2株PRRSV商品活疫苗以及52个猪场所送检的184份临床样品进行了检测应用,结果36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料的细胞培养物有5份样品为阳性且都为高致病性PRRSV,2株PRRSV商品活疫苗为普通PRRSV,52个猪场中有42个猪场(123份样品)呈阳性,其中只有1份为普通PRRSV.实验表明该方法能够准确地鉴别诊断高致病性PRRSV和普通PRRSV,且具有快速,敏感和特异的特点,具有临床实用性.

关 键 词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病  鉴别诊断

Development and Clinical Application of RT-PCR Differential Diagnosis Method for High Virulent Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome
LIU Zhong-Hu,YU Xing-Long,LI Run-Cheng,HUANG Ze-Bin,LIAO Li-Shan,BAI Xi,LI Jing,XIANG Wei-Jun,WANG Zhen-Nan and DING Jian.Development and Clinical Application of RT-PCR Differential Diagnosis Method for High Virulent Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome[J].Microbiology,2008,35(8):1268-1272.
Authors:LIU Zhong-Hu  YU Xing-Long  LI Run-Cheng  HUANG Ze-Bin  LIAO Li-Shan  BAI Xi  LI Jing  XIANG Wei-Jun  WANG Zhen-Nan and DING Jian
Institution:College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128;College of Veterinary Medicine, Hunan Agricultural University, Changsha 410128
Abstract:
Keywords:RT-PC
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