| SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌 |
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| 引用本文： | 王静,刘玉敏,李春喜,赵丽青,秦燕,张慧敏.SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌[J].微生物学通报,2016,43(10):2306-2313. |
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| 作者姓名： | 王静 刘玉敏 李春喜 赵丽青 秦燕 张慧敏 |
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| 作者单位： | 1. 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 威海 264205,1. 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 威海 264205,1. 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 威海 264205,2. 山东出入境检验检疫局 山东 青岛 266500,1. 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 威海 264205,1. 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心 山东 威海 264205 |
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| 基金项目： | 国家质检总局科技计划项目(No. 2014IK114) |
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| 摘 要： | 【目的】检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。【方法】利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。【结果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增。经过SD和PMA对样品预处理,dd PCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假阳性"结果的出现。活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-dd PCR的灵敏度为2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和稳定性良好。【结论】SD-PMA-dd PCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间。
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| 关 键 词： | 叠氮溴化丙锭，脱氧胆酸钠，微滴式数字PCR，单核细胞增生李斯特氏菌 |
Detection of Listeria monocytogenes cells in food based on SD-PMA-ddPCR |
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| WANG Jing,LIU Yu-Min,LI Chun-Xi,ZHAO Li-Qing,QIN Yan and ZHANG Hui-Min.Detection of Listeria monocytogenes cells in food based on SD-PMA-ddPCR[J].Microbiology,2016,43(10):2306-2313. |
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| Authors: | WANG Jing LIU Yu-Min LI Chun-Xi ZHAO Li-Qing QIN Yan and ZHANG Hui-Min |
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| Institution: | 1. Weihai Entry-exit Inspection and Quarantine Inspection and Quarantine Technology Center, Weihai, Shandong 264205, China,1. Weihai Entry-exit Inspection and Quarantine Inspection and Quarantine Technology Center, Weihai, Shandong 264205, China,1. Weihai Entry-exit Inspection and Quarantine Inspection and Quarantine Technology Center, Weihai, Shandong 264205, China,2. Shandong entry-exit inspection and quarantine bureau, Qingdao, Shandong 266500, China,1. Weihai Entry-exit Inspection and Quarantine Inspection and Quarantine Technology Center, Weihai, Shandong 264205, China and 1. Weihai Entry-exit Inspection and Quarantine Inspection and Quarantine Technology Center, Weihai, Shandong 264205, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Propidium monoazide Sodium deoxycholate ddPCR L monocytogenes |
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