| 蜡样芽孢杆菌聚乙烯醇脱氢酶的表达及酶学特性 |
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| 引用本文： | 张晓东,王鑫钰,张毅.蜡样芽孢杆菌聚乙烯醇脱氢酶的表达及酶学特性[J].微生物学通报,2023,50(5):1840-1852. |
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| 作者姓名： | 张晓东 王鑫钰 张毅 |
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| 作者单位： | 华南理工大学生物科学与工程学院, 广东 广州 510006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金联合基金项目(U1301231) |
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| 摘 要： | 【背景】聚乙烯醇脱氢酶(polyvinyl alcohol dehydrogenase,PVADH)能够使聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)氧化脱氢，在PVA的生物降解过程中起到重要作用。【目的】从PVA降解菌株蜡样芽孢杆菌DG01中获取pvadh基因，实现PVADH在毕赤酵母中的异源表达并探究其对不同型号PVA的降解特异性，为PVADH在PVA实际降解中的应用提供指导。【方法】通过反转录扩增技术获得长度为1 965 bp的pvadh基因片段，构建pPIC9K-cpvadh重组表达质粒并在毕赤酵母GS115中实现异源表达，甲醇诱导表达蛋白，进行分离纯化后对其酶学性质及降解特异性进行研究。【结果】最佳发酵条件下PVADH粗酶液酶活达到54.55 U/mL。经分离纯化后表达蛋白PVADH的比酶活为173.42 U/mg，分子量为67.1 kDa，等电点为6.06，该酶最适作用温度为41℃，最适作用pH值为7.5，在27-32℃、pH 7.0-8.0条件下酶的半衰期超过4 h,1 mmol/L的Ca2+对酶活力有激活作用。PVADH分别作用于PVA1788、PVA1799...
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| 关 键 词： | 聚乙烯醇 聚乙烯醇脱氢酶 异源表达 降解特异性 |
| 收稿时间： | 2022/7/25 0:00:00 |
Expression and properties of polyvinyl alcohol dehydrogenase from Bacillus cereus |
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| ZHANG Xiaodong,WANG Xinyu,ZHANG Yi.Expression and properties of polyvinyl alcohol dehydrogenase from Bacillus cereus[J].Microbiology,2023,50(5):1840-1852. |
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| Authors: | ZHANG Xiaodong WANG Xinyu ZHANG Yi |
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| Institution: | School of Biology and Biological Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | polyvinyl alcohol polyvinyl alcohol dehydrogenase heterologous expression enzymatic properties |
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