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中国木薯醇腈酶在汉逊酵母中的表达
引用本文:张冬冬,雷白时,姜军坡,牛振东,邱并生,朱宝成.中国木薯醇腈酶在汉逊酵母中的表达[J].微生物学通报,2009,36(6):0794-0798.
作者姓名:张冬冬  雷白时  姜军坡  牛振东  邱并生  朱宝成
作者单位:1. 河北农业大学生命科学学院,河北,保定,071001
2. 中国科学院微生物研究所,北京,100091
摘    要:α-醇腈酶(α-hydroxynitrilelyase, HNL)是手性醇腈化合物生物合成十分有用的工具, 能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。应用PCR扩增得到HNL基因, 连接到pMD18-T 中进行测序, 然后通过EcoRⅠ和NotⅠ将其连接到汉逊酵母表达载体pHMOXGαA中。通过在含有4 mg/mL的G418的YPD培养基上进行筛选获得阳性重组子, 用0.5%的甲醇诱导96 h。酶活测定和SDS-PAGE分析显示HNL在汉逊酵母NCYC495(leu1.1)中得到正确表达, 每毫升发酵液中获得2.015 U的醇腈酶。

关 键 词:中国木薯醇腈酶    汉逊酵母    25S  rDNA    自主复制序列

Expression of Hydroxynitrile Lyase from Chinese Subspecies of Manihot Esculenta in Hansenula Polymorpha
ZHANG Dong-Dong,LEI Bai-Shi,JIANG Jun-Po,NIU Zhen-Dong,QIU Bing-Sheng and ZHU Bao-Cheng.Expression of Hydroxynitrile Lyase from Chinese Subspecies of Manihot Esculenta in Hansenula Polymorpha[J].Microbiology,2009,36(6):0794-0798.
Authors:ZHANG Dong-Dong  LEI Bai-Shi  JIANG Jun-Po  NIU Zhen-Dong  QIU Bing-Sheng and ZHU Bao-Cheng
Institution:College of life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071001, China;College of life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071001, China;College of life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071001, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100091, China;Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100091, China;College of life Science, Agricultural University of Hebei, Baoding, Hebei 071001, China
Abstract:
Keywords:Hydroxynitrile lyase from Chinese subspecies of Manihot esculenta  Hansenula polymorpha  25S rDNA  Hansenula auto-replication sequence
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