| 血清2型鸭疫里默氏杆菌脂多糖单克隆抗体的研制及特性鉴定 |
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| 引用本文： | 张雪梅,王小兰,任晓梅,陈宗超,王桂军,于圣青.血清2型鸭疫里默氏杆菌脂多糖单克隆抗体的研制及特性鉴定[J].微生物学通报,2019,46(1):113-119. |
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| 作者姓名： | 张雪梅 王小兰 任晓梅 陈宗超 王桂军 于圣青 |
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| 作者单位： | 1 安徽农业大学动物科技学院 安徽 合肥 230036;2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241,1 安徽农业大学动物科技学院 安徽 合肥 230036,2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2016YFD0500805)；国家自然科学基金(31602069)；中国博士后科学基金(2016M600153) |
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| 摘 要： | 【背景】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)可感染雏鸭、鹅、火鸡等多种禽类,引起急性或慢性传染病。RA血清型众多且各血清型之间缺乏有效的交叉保护。细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)位于革兰氏阴性菌细胞壁的外侧,其组成和结构变化决定了细菌表面抗原决定簇的多样性。【目的】制备血清2型鸭疫里默氏杆菌LPS单克隆抗体并对其特性进行研究。【方法】以血清2型RA NJ3株免疫BALB/c小鼠,细胞融合后以RA NJ3株LPS作为包被抗原,筛选出能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过体内诱生腹水法制备抗体,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测单克隆抗体效价,玻片凝集试验和Westernblot检测单抗特异性。【结果】获得两株能稳定分泌抗血清2型鸭疫里默氏杆菌LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为8G5和8G10;两株单抗的亚型均为IgM/κ链。ELISA结果表明,8G5和8G10腹水效价分别为1:32 000和1:16 000。Western blot结果显示,两株单抗仅与血清2型RA菌株发生特异性反应,而与其他血清型RA菌株和禽源致病菌无反应性。【结论】研究获得的单克隆抗体具有良好的反应性和血清型特异性,可用于RA致病机制的基础研究和进一步建立RA血清型快速检测方法。
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| 关 键 词： | 鸭疫里默氏杆菌，单克隆抗体，免疫学特性，脂多糖 |
Preparation and characterization of monoclonal antibodies against lipopolysaccharide from Riemerella anatipestifer serotype 2 strain |
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| ZHANG Xue-Mei,WANG Xiao-Lan,REN Xiao-Mei,CHEN Zong-Chao,WANG Gui-Jun and YU Sheng-Qing.Preparation and characterization of monoclonal antibodies against lipopolysaccharide from Riemerella anatipestifer serotype 2 strain[J].Microbiology,2019,46(1):113-119. |
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| Authors: | ZHANG Xue-Mei WANG Xiao-Lan REN Xiao-Mei CHEN Zong-Chao WANG Gui-Jun and YU Sheng-Qing |
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| Institution: | 1 College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China; 2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,1 College of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China and 2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Riemerella anatipestifer Monoclonal antibody Specificity Lipopolysaccharide |
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