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分子信标-实时 PCR法快速检测双歧杆菌的研究
引用本文:王超,孟祥晨.分子信标-实时 PCR法快速检测双歧杆菌的研究[J].微生物学通报,2007,34(6):1163-1168.
作者姓名:王超  孟祥晨
作者单位:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室食品学院,哈尔滨,150030
摘    要:为建立双歧制品中双歧杆菌快速、敏感、特异的检测方法,根据双歧杆菌16SrRNA/16SrDNA基因设计合成了双歧杆菌属特异性引物和分子信标探针,建立了快速检测双歧杆菌的分子信标-实时PCR检测方法,并对反应条件进行优化。检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%;特异性强,扩增曲线呈现明显的S型,无非特异性扩增;灵敏度高,是普通PCR的100倍,对纯双歧杆菌DNA的检出限为5.7fg/PCR反应体系,纯双歧杆菌菌液的检出限为2×103CFU/mL;线形范围宽,起始模板数在2×108CFU/mL~2×104CFU/mL之间具有良好的线性关系,相关系数大于97%。该方法具有灵敏、特异、简便和快速的特点,可用于对双歧杆菌原位菌数的定量检测。

关 键 词:双歧杆菌  分子信标  实时PCR  探针  检测
文章编号:0253-2654(2007)06-1163-06
收稿时间:2007-03-07
修稿时间:2007-05-10

Establishment of Real-Time PCR and Molecular Beacon Detection Method for Bifidobacteria
WANG Chao and MENG Xiang-Chen.Establishment of Real-Time PCR and Molecular Beacon Detection Method for Bifidobacteria[J].Microbiology,2007,34(6):1163-1168.
Authors:WANG Chao and MENG Xiang-Chen
Institution:Key Laboratory of Dairy Science, Ministry of Education, Food Science & Technology College, Northeast Agricultural University, Harbin 150030;Key Laboratory of Dairy Science, Ministry of Education, Food Science & Technology College, Northeast Agricultural University, Harbin 150030
Abstract:
Keywords:Bifidobacteria  Molecular beacon  Real-time PCR  Probe  Detection
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