| 冬虫夏草固态培养菌丝中纤溶酶的纯化和酶学性质 |
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| 引用本文： | 臧琬婷,梅余霞,梁运祥.冬虫夏草固态培养菌丝中纤溶酶的纯化和酶学性质[J].微生物学通报,2020,47(2):562-570. |
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| 作者姓名： | 臧琬婷 梅余霞 梁运祥 |
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| 作者单位： | 华中农业大学生命科学技术学院 微生物农药国家工程研究中心 湖北 武汉 430070,华中农业大学生命科学技术学院 微生物农药国家工程研究中心 湖北 武汉 430070,华中农业大学生命科学技术学院 微生物农药国家工程研究中心 湖北 武汉 430070 |
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| 基金项目： | 中央高校基本科研业务费专项资金项目(2662015PX199) |
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| 摘 要： | 【背景】血栓性疾病发病率逐年递增,发病人群呈现低龄化趋势,严重地影响着人们的身心健康。因此研发高效、安全、特异性强的溶栓药物具有重要的意义,是血栓性疾病预防与治疗研究领域的热点。【目的】对冬虫夏草菌丝固态培养过程中产生的纤溶酶进行分离纯化,并对纯化的纤溶酶进行酶学性质分析。【方法】通过硫酸铵盐析、阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶过滤色谱分离纯化虫草纤溶酶。采用Bradford法测定样品中总蛋白质浓度,纤维蛋白平板法测定纤溶酶活性,Native-PAGE检测纯度,SDS-PAGE测定相对分子量。【结果】在固态培养中冬虫夏草菌丝可以产生至少两种纤溶酶,分别命名为OSP-1和OSP-2。纯化后OSP-1比活力达到4186.25U/mg,纯化倍数为41.69倍。OSP-1由两个亚基构成,相对分子量分别为27.60k D和23.83k D,是一种丝氨蛋白酶。酶学性质分析表明,该酶最适作用温度为40°C,最适pH为4.0。Cu2+可促进OSP-1酶活,而Zn2+会抑制酶活。除了具有较高的纤溶酶活性,OSP-1还可发挥激活纤维蛋白酶原的作用。在水解纤维蛋白原的过程中,该酶可依次降解γ、Aα、Bβ链。【结论】研究发现的OSP-1具有开发成新型溶栓药物的潜力。
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| 关 键 词： | 冬虫夏草，纤溶酶，分离纯化，酶学性质 |
Purification and characterization of Ophiocordyceps sinensis plasmin from solid culture mycelia |
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| ZANG Wan-Ting,MEI Yu-Xia and LIANG Yun-Xiang.Purification and characterization of Ophiocordyceps sinensis plasmin from solid culture mycelia[J].Microbiology,2020,47(2):562-570. |
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| Authors: | ZANG Wan-Ting MEI Yu-Xia and LIANG Yun-Xiang |
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| Institution: | College of Life Science and Technology, National Engineering Research Center of Microbial Pesticides, Huazhong Agricultural University, Wuhan, Hubei 430070, China,College of Life Science and Technology, National Engineering Research Center of Microbial Pesticides, Huazhong Agricultural University, Wuhan, Hubei 430070, China and College of Life Science and Technology, National Engineering Research Center of Microbial Pesticides, Huazhong Agricultural University, Wuhan, Hubei 430070, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ophiocordyceps sinensis plasmin separation and purification enzymatic properties |
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