| 基因重组与外源铁离子对大肠杆菌合成血红素的影响 |
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| 引用本文： | 王悦,杨燕,刘琪,唐蕾.基因重组与外源铁离子对大肠杆菌合成血红素的影响[J].微生物学通报,2023,50(8):3382-3391. |
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| 作者姓名： | 王悦 杨燕 刘琪 唐蕾 |
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| 作者单位： | 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学 工业生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学生物工程学院, 江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 111引智计划(111-2-06)；国家轻工技术与工程一流学科自主课题(LITE2018-27) |
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| 摘 要： | 【背景】大肠杆菌通过C5途径合成卟啉及血红素，5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)是C5途径中关键的前体物质，血红素由原卟啉IX (protoporphyrin IX, PPIX)螯合一个铁离子所形成，目前5-ALA与PPIX的外泌对卟啉的积累和血红素合成的影响尚不清楚。【目的】构建5-ALA外泌蛋白基因rhtA和卟啉外泌蛋白基因tolC双缺失的大肠杆菌以积累卟啉，同时外源添加铁离子，并过表达亚铁螯合酶基因hemH及参与铁摄取的基因efeB，促进卟啉向血红素的转化。【方法】通过Red同源重组敲除大肠杆菌BL21(DE3)的rhtA和tolC，并外源添加不同浓度的FeSO4及Fe2(SO4)3，同时构建重组质粒pEHE过表达hemH和efeB，检测卟啉和血红素含量，分析卟啉向血红素的转化。【结果】敲除rhtA和tolC对菌体生长无显著影响，与野生菌WT相比，敲除菌株WT-RT的卟啉含量增加，血红素合成略有提升。外源添加100μmol/L Fe2+
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 rhtA tolC 卟啉 积累 转化 |
| 收稿时间： | 2022/11/8 0:00:00 |
Effects of genetic recombination and exogenous iron on heme synthesis in Escherichia coli |
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| WANG Yue,YANG Yan,LIU Qi,TANG Lei.Effects of genetic recombination and exogenous iron on heme synthesis in Escherichia coli[J].Microbiology,2023,50(8):3382-3391. |
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| Authors: | WANG Yue YANG Yan LIU Qi TANG Lei |
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| Institution: | Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China; Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China;School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Escherichia coli rhtA tolC porphyrins accumulation transformation |
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