肠炎沙门氏菌基因工程减毒株的免疫效果及安全性评价

背景] 相较于灭活疫苗和弱毒疫苗，沙门氏菌（Salmonella）基因工程减毒活疫苗具有的优越性逐渐显现，研究也不断深入。目的] 探究肠炎沙门氏菌G9菌株的4株基因缺失株G9（ΔhilA）、G9（ΔhilD）、G9（ΔssrABhilA）和G9（ΔssrABhilAhilD）的免疫效果及生物安全性。方法] 以肠炎沙门氏菌基因缺失菌株G9（ΔhilA）、G9（ΔhilD）、G9（ΔssrABhilA）、G9（ΔssrABhilAhilD）及其亲本菌株G9的最佳免疫剂量接种小鼠后，利用间接ELISA法、流式细胞术、MTT法、小鼠攻毒试验及倾注平板法等对各缺失株的免疫效果和安全性进行评价。结果] G9（ΔhilD）诱导血清IgG抗体效价最高，G9（ΔhilD）和G9（ΔssrABhilAhilD）产生肠黏膜IgA抗体效价最高，4株缺失菌诱导IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-β、MCP-1细胞因子的能力与亲本株G9差异不显著（P>0.05），产生的CD4⁺/CD3⁺、CD8⁺/CD3⁺ T细胞比率呈上升趋势，而且G9（ΔssrABhilA）和G9（ΔssrABhilAhilD）最高；G9（ΔssrABhilAhilD）诱发的脾淋巴细胞增殖指数最高；免疫小鼠后4株缺失株对G9攻毒提供的保护率为80%-100%，而且小鼠肝脏、脾脏及小肠绒毛无明显病理变化，对鼠伤寒沙门氏菌攻毒提供的保护率为50%-80%；接种后12 d，小鼠肝脏、脾脏及小肠中定殖的菌株能基本清除，而且在体外能连续稳定传代30代。结论] G9（ΔhilA）、G9（ΔhilD）、G9（ΔssrABhilA）和G9（ΔssrABhilAhilD）对小鼠的免疫效果和生物安全性均良好，有成为肠炎沙门氏菌基因工程减毒活疫苗的可能。

Evaluation of immunogenicity and safety of genetic engineering attenuated strains for Salmonella enteritidis