| 抗肉毒毒素A人源单链抗体在酵母细胞中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 王慧,荫俊,侯晓军,邢洪光.抗肉毒毒素A人源单链抗体在酵母细胞中的分泌表达[J].微生物学通报,2005,32(2):50-53. |
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| 作者姓名： | 王慧 荫俊 侯晓军 邢洪光 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究973项目资助(No.2002CB513205). |
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| 摘 要： | 将特异肉毒抗毒素基因克隆入载体pPIC9k，G418抗性加压筛选阳性整合克隆，在毕赤酵母细胞GS115中进行分泌表达。获得了稳定分泌表达ScFv的工程菌，SDS—PAGE分析可见，目的蛋白分子量约为26kD，通过放大体积来探索重组抗毒素的诱导表达条件及纯化工艺，结果发现，1％甲醇诱导后72～84h，目的蛋白的表达达到高峰，占酵母培养上清中总蛋白的15％以上，经两步层析纯化，目的蛋白纯度可达95％。竞争活性测定结果表明，重组抗毒素在体外具有良好的活性，可竞争肉毒抗毒素马血清与毒素的特异结合。
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| 关 键 词： | 人源单链抗体 分泌表达 纯化 毕赤酵母 |
| 文章编号： | 0253-2654(2005)02-0050-04 |
| 修稿时间： | 2004年7月5日 |
High-level Secretion Expression of Human ScFv Against Botulinum Neurotoxin A in Pichia pastoris |
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| WANG Hui,YIN Jun,HOU Xiao-Jun,XING Hong-Guang.High-level Secretion Expression of Human ScFv Against Botulinum Neurotoxin A in Pichia pastoris[J].Microbiology,2005,32(2):50-53. |
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| Authors: | WANG Hui YIN Jun HOU Xiao-Jun XING Hong-Guang |
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| Institution: | WANG Hui ** YIN Jun HOU Xiao-Jun XING Hong-Guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human ScFv Secretion expression Purification Pichia pastoris |
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