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植酸酶酵母工程菌的构建*
引用本文:李桂兰, 祝建洪, 孙建, 陈佳, 李明刚,.植酸酶酵母工程菌的构建*[J].微生物学通报,2004,31(6):11-15.
作者姓名:李桂兰  祝建洪  孙建  陈佳  李明刚  
作者单位:1. 南开大学分子生物学研究所,天津,300071;河北科技师范学院,昌黎,066600
2. 南开大学分子生物学研究所,天津,300071
基金项目:国家高技才研究发展计划项目 ( 863项目 ) (No 2 0 0 2AA2 1 3 0 61 ),国家转基因植物研究和产业化专项 (No J0 0 B 0 0 3 0 5 )
摘    要:从无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3.4322中用RT-PCR方法扩增出一条约1.4kb的特异性条带,DNA序列测定表明,目的片段为不含信号肽的植酸酶编码序列,全长1347bp。无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3.4322phyA基因序列已在GenBank注册(注册号为:AF537344)。将该基因克隆到酵母表达载体pYES2中,构建成不带信号肽phyA基因的重组表达载体pYPA2。用醋酸锂法将pYPA2转进urd缺陷型的酿酒酵母(s.oeraisiae INVSc1),筛选获得含植酸酶基因的酵母转化子。经半乳糖诱导表达后,用磷钼蓝显色(AMES)法对酵母菌体进行酶活测定,测出了明显的植酸酶活性,pYPA2胞内植酸酶活性约11.55IU/mL,表明无花果曲霉(Aspergillus ficuum)3.4322phyA基因能在酿酒酵母中表达。

关 键 词:无花果曲霉  phyA基因  酿酒酵母  表达
文章编号:0253-2654(2004)06-0011-05
修稿时间:2004年1月29日

The Construction of a Transgenic Yeast Strain Expression Phytase
LI Gui-Lan , ZHU Jian-Hong SUN Jian CHEN Jia LI Ming-Gang.The Construction of a Transgenic Yeast Strain Expression Phytase[J].Microbiology,2004,31(6):11-15.
Authors:LI Gui-Lan  ZHU Jian-Hong SUN Jian CHEN Jia LI Ming-Gang
Institution:LI Gui-Lan 1,2 ZHU Jian-Hong 1 SUN Jian 1 CHEN Jia 1 LI Ming-Gang 1**
Abstract:
Keywords:Aspergillus ficuum 3  4322  phyA  Saccharomyces cerevisiae INVSc1  Expressed
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