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Genome shuffling筛选ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响
引用本文:李双,颜鹏,曾晨,张宏建,毛忠贵,唐蕾.Genome shuffling筛选ε-聚赖氨酸高产菌及其对代谢流量分配的影响[J].微生物学通报,2016,43(12):2568-2577.
作者姓名:李双  颜鹏  曾晨  张宏建  毛忠贵  唐蕾
作者单位:1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122,1. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学生物工程学院 江苏 无锡 214122
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 21376106);111引智计划(No. 111-2-06)
摘    要:【目的】从代谢流量分配的角度,探讨Genome shuffling导致链霉菌ε-聚赖氨酸合成量提升的原因。【方法】从葡萄糖耐受型的亲本菌株Streptomyces sp.AS32和ε-聚赖氨酸耐受型的亲本菌株Streptomyces albulus F15出发,进行三轮Genome shuffling,筛选得到ε-聚赖氨酸产量提高的链霉菌株Streptomyces sp.AF3-44,采用通量分析方法构建链霉菌ε-聚赖氨酸合成代谢网络,并对上述3株菌的代谢通量进行比较。【结果】AF3-44的ε-聚赖氨酸摇瓶产量为3.1 g/L,较AS32和F15分别提高了34%和29%。3株菌株中AS32三羧酸循环(TCA)的代谢通量最高;F15磷酸戊糖途径(PPP)代谢通量最高;AF3-44流向赖氨酸合成前体天冬氨酸以及ε-聚赖氨酸的通量最高,TCA和PPP通量位于两亲本菌株的中间水平,其中TCA中流向异柠檬酸的通量分别为AS32和F15的77%和116%,PPP中流向5-磷酸核酮糖的通量分别为AS32和F15的149%和92%。【结论】Genome shuffling导致了代谢流的重新分布,流向前体赖氨酸和ε-聚赖氨酸通量的增加,以及PPP和TCA通量配比的改变是链霉菌ε-聚赖氨酸合成量增加的重要因素。

关 键 词:Genome  shuffling,代谢通量,代谢网络,ε-聚赖氨酸
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