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钝齿棒杆菌的代谢改造:L-鸟氨酸与L-瓜氨酸合成菌株的构建
引用本文:赵芹芹,罗玉常,窦文芳,张晓梅,耿燕,许正宏.钝齿棒杆菌的代谢改造:L-鸟氨酸与L-瓜氨酸合成菌株的构建[J].微生物学通报,2014,41(10):1941-1947.
作者姓名:赵芹芹  罗玉常  窦文芳  张晓梅  耿燕  许正宏
作者单位:1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;1. 江南大学 药学院 制药工程研究室 江苏 无锡 214122;2. 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室 江苏 无锡 214122
基金项目:国家863计划项目(No. 2012AA022102)
摘    要:【目的】对一株产L-精氨酸的钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)SYPA5-5进行代谢工程改造,构建L-鸟氨酸和L-瓜氨酸合成菌株,并考察其发酵生产相应氨基酸的性能。【方法】分别敲除菌株SYPA5-5鸟氨酸氨甲酰转移酶(Ornithine carbamoyltransferase,OTC)的编码基因argF和精胺琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthase,ASS)的编码基因argG,构建能够合成L-鸟氨酸及L-瓜氨酸的重组菌株SYPA5-5△argF和SYPA5-5△argG;考察不同营养条件对上述重组菌株生长和相应氨基酸积累的影响。【结果】添加0.3 g/L L-精氨酸可满足SYPA5-5△argF的生长及L-鸟氨酸积累所需,L-鸟氨酸产量可达21.5 g/L;添加L-精氨酸有利于SYPA5-5△argG的生长,但不利于L-瓜氨酸的积累;不添加L-精氨酸时,L-瓜氨酸产量可达15.2 g/L,同时积累6.8 g/L的L-谷氨酸。【结论】分别敲除L-精氨酸生产菌株SYPA5-5的argF及argG基因,可实现L-精氨酸合成途径的中间代谢物L-瓜氨酸和L-鸟氨酸的积累,拓展了该菌株的工业应用范围。

关 键 词:L-鸟氨酸,L-瓜氨酸,钝齿棒杆菌,鸟氨酸氨甲酰转移酶,argF,精胺琥珀酸合成酶,argG

Engineering Corynebacterium crenatum for construction of L-Ornithine and L-Citrulline producers
ZHAO Qin-Qin,LUO Yu-Chang,DOU Wen-Fang,ZHANG Xiao-Mei,GENG Yan and XU Zheng-Hong.Engineering Corynebacterium crenatum for construction of L-Ornithine and L-Citrulline producers[J].Microbiology,2014,41(10):1941-1947.
Authors:ZHAO Qin-Qin  LUO Yu-Chang  DOU Wen-Fang  ZHANG Xiao-Mei  GENG Yan and XU Zheng-Hong
Institution:1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China;1. Laboratory of Pharmaceutical Engineering, School of Pharmaceutical Science, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; 2. The Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China
Abstract:
Keywords:L-Ornithine  L-Citrulline  Corynebacterium crenatum  Ornithine carbamoyltransferase  argF  Argininosuccinate synthase  argG
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