| 荧光标记噬菌体快速检测K1荚膜大肠杆菌方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 黄豪圣,王许航,席静,巩倩雯,薛峰,任建鸾,汤芳,戴建君.荧光标记噬菌体快速检测K1荚膜大肠杆菌方法的建立及应用[J].微生物学通报,2021,48(9):3218-3229. |
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| 作者姓名： | 黄豪圣 王许航 席静 巩倩雯 薛峰 任建鸾 汤芳 戴建君 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院 农业农村部动物细菌学重点实验室 江苏 南京 210095;广州海关技术中心 广东 广州 510623;南京农业大学动物医学院 农业农村部动物细菌学重点实验室 江苏 南京 210095;中国药科大学生命科学与技术学院 江苏 南京 210095 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2019YFC1605400）；江苏省自然科学基金优秀青年基金（BK20180075） |
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| 摘 要： | 【背景】大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)是引发新生儿脑膜炎和禽类脑膜炎最常见的革兰氏阴性菌,其中含K1荚膜大肠杆菌是重要的病原菌。目前,K1荚膜大肠杆菌的检测方法存在一些弊端。【目的】利用PNJ1809-36噬菌体的宿主特异性建立快速检测K1荚膜大肠杆菌的方法。【方法】用荧光染料SYBR Gold标记PNJ1809-36噬菌体,侵染33株受试菌,在荧光显微镜下观察,测定该方法的特异性;倍比稀释宿主菌DE058,用荧光标记噬菌体侵染,测定该方法的灵敏度;用荧光标记噬菌体检测8份模拟粪样,测定该方法的临床应用效果;测定4℃避光保存4个月的荧光标记噬菌体的效价和检测效果。【结果】33株受试菌中的9株K1荚膜大肠杆菌有8株可见环状荧光,1株未能检出;20株非K1荚膜大肠杆菌以及4株非大肠杆菌属细菌均不能观察到荧光,检测灵敏度达100CFU/mL。8份模拟粪样的检测结果显示,3份含有K1荚膜大肠杆菌的粪样均可见环状荧光,5份不含K1荚膜大肠杆菌的粪样均无荧光。荧光标记噬菌体4℃避光保存4个月后效价无明显下降,检测效果无明显变化,表明该荧光标记噬菌体在4℃避光条件下较稳定。【结论】用荧光标记的PNJ1809-36噬菌体能够在15min内特异、快速、直观地检测K1荚膜大肠杆菌。
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| 关 键 词： | 噬菌体 荧光标记 大肠杆菌 检测 K1荚膜 |
| 收稿时间： | 2021/6/8 0:00:00 |
Establishment and application of fluorescence labeled phage for rapid detection of Escherichia coli K1 |
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| HUANG Haosheng,WANG Xuhang,XI Jing,GONG Qianwen,XUE Feng,REN Jianluan,TANG Fang,DAI Jianjun.Establishment and application of fluorescence labeled phage for rapid detection of Escherichia coli K1[J].Microbiology,2021,48(9):3218-3229. |
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| Authors: | HUANG Haosheng WANG Xuhang XI Jing GONG Qianwen XUE Feng REN Jianluan TANG Fang DAI Jianjun |
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| Institution: | Key Laboratory of Animal Bacteriology, Ministry of Agriculture and Rural Affairs;College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095, China;Guangzhou Customs District Technology Center, Guangzhou, Guangdong 510623, China; Key Laboratory of Animal Bacteriology, Ministry of Agriculture and Rural Affairs;College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095, China;School of Life Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanjing, Jiangsu 210095, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phage fluorescence labeling Escherichia coli detection K1 capsule |
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