mdlA基因在毕赤酵母中的高效表达及表达产物性质研究* |
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引用本文: | 李琦, 王雅琴, 谭天伟, 王子镐,.mdlA基因在毕赤酵母中的高效表达及表达产物性质研究*[J].微生物学通报,2006,33(1). |
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作者姓名: | 李琦 王雅琴 谭天伟 王子镐 |
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作者单位: | 1.北京化工大学生命科学与技术学院; 2.北京市生物加工过程重点实验室; |
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摘 要: | 将编码甘油单-二酰酯脂肪酶(MDGL)的基因mdlA插入到分泌表达质粒pPIC9K中,通过电激将线性化的重组质粒整合到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,筛选出H is+Mut+表型菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子,并用PCR方法鉴定。诱导培养后,SDS-PAGE表明MDGL在毕赤酵母中得到有效表达。表达产物在温度40℃,pH7.5具有最高活性,其发酵液酶活可达到325U/mL,以橄榄油为底物时没有检测到活性。表达产物与甘油三酰酯脂肪酶共同作用时产生的脂肪酸量比
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关 键 词: | 甘油单-二酰酯脂肪酶 毕赤酵母 表达 |
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