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一种快速、精确构建大肠杆菌组氨酸营养缺陷型的方法
引用本文:王芃,袁盛凌,郑继平,李淑琴,段海清,张兆山.一种快速、精确构建大肠杆菌组氨酸营养缺陷型的方法[J].微生物学通报,2004,31(2):95-99.
作者姓名:王芃  袁盛凌  郑继平  李淑琴  段海清  张兆山
作者单位:军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071
基金项目:国家高技术研究发展计划项目 (“86 3”项目 ) (No 2 0 0 1AA2 15 2 11)~~
摘    要:将表达Red体内重组蛋白的质粒pKD46转化大肠杆菌:DH5α,用5′端与组氨酸基因同源,3′端与卡那霉素抗性基因同源的引物获得具有卡那霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化DH5α,在λRed重组系统的帮助下,通过卡那霉素抗性基因两侧的组氨酸基因序列在体内与大肠杆菌染色体上的组氨酸基因发生同源重组,置换了DH5α组氨酸操纵元中的hisDCB基因,最后利用卡那霉素抗性基因两端的FRT位点,通过FTP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因去除,最终获得了不具抗性的大肠杆菌组氨酸营养缺陷型菌株。为在大肠杆菌及其他菌株中快速、精确的构建营养缺陷型菌株提供了有益的参考。

关 键 词:大肠杆菌  营养缺陷型  体内同源重组
文章编号:0253-2654(2004)02-0095-05
修稿时间:2003年8月5日

A QUICK AND PRECISION METHOD TO CONSTRUCT ESCHERICHIA COLI HISTIDINE AUXOTROPH
WANG Peng,YUAN Sheng-Ling\ ZHENG Ji-Ping\ LI Shu-Qin\ DUAN Hai-Qing\ ZHANG Zhao-Shan.A QUICK AND PRECISION METHOD TO CONSTRUCT ESCHERICHIA COLI HISTIDINE AUXOTROPH[J].Microbiology,2004,31(2):95-99.
Authors:WANG Peng  YUAN Sheng-Ling\ ZHENG Ji-Ping\ LI Shu-Qin\ DUAN Hai-Qing\ ZHANG Zhao-Shan
Abstract:
Keywords:Escherichia coli  Auxotroph  In vivo homologous recombination
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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