苏云金杆菌辅助蛋白基因p19和orf1-orf2对杀虫晶体蛋白CytlAa表达的影响

为检测苏云金杆菌辅助蛋白P19和0RFl—0RF2对杀虫晶体蛋白CytlAa表达的影响，构建了5个重组表达质粒。5个质粒都含有cytlAa基因，但pT1只含有cytlAa基因，p他同时含有p19基因，pt3同时含有orf1-orf2串联基因，pT4同时含有p19基因和p20基因，pT5同时含有orf1-orf2串联基因和p20基因。将这5个表达质粒和质粒pWF45电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型4Q7中，分别获得转化菌株Bt—T1、Bt—T2、Bt—T3、Bt—T4、Bt—T5和Bt—WF45。SDS—PAGE结果显示，菌株Bt—T1、Bt—T2和Bt—T3只产生少量的27kD cytlAa蛋白，而且部分降解为大约24kD的蛋白。而Bt—T4和Bt—T5能产生大量的cytlAa蛋白，但Bt—T4和Bt—T5的cytlAa蛋白产量都明显少于Bt—WF45。电镜观察和生物测定结果表明Bt—T4和Bt—T5与Bt—WF45的晶体大小和杀蚊毒力没有显性差异。研究表明p19和ORF1—ORF2对CytlAa。蛋白的合成显示可能有抑制作用。