水稻液泡ATPase B亚基基因的克隆及其在低磷胁迫下的表达特征分析

利用抑制性扣除杂交（SSH）技术构建水稻（Oryza sativa L.）根系饥饿诱导cDNA文库，获得编码液泡ATPase（V-ATPase）B亚基的克隆，通过反转录PCR方法获得该基因的完整序列。该基因编码487个氨基酸，含有一个保守的ATP结合位点，其蛋白分子量为54.06kD，等电点为4.99。Southern印迹表明，V-ATPase B亚基基因在水稻基因组中以单拷贝形式存在。氮基酸同源性分析发现，V-ATPase B亚基是一个较为保守的蛋白亚基，其序列变化伴随生物的进化过程同步进行。Northern印迹表明，V-ATPase B亚基在水稻根系中受到磷饥饿诱导表达，磷饥饿6～12h出现表达高峰，而在叶片中表达有所滞后（24～48h），在缺磷环境条件下，ATPase B亚基可能通过提高其表达量，进而提高质子转运活性，形成跨膜的电化学梯度，为体内储备磷跨液泡膜运输提供能量，从而提高植物体内磷的利用效率及其耐低磷的能力。