利用双T-DNA载体系统培育无选择标记转基因烟草 |
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引用本文: | 周红艳,陈松彪,李旭刚,肖桂芳,魏晓丽,朱祯.利用双T-DNA载体系统培育无选择标记转基因烟草[J].Acta Botanica Sinica,2003,45(9):1103-1108. |
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作者姓名: | 周红艳 陈松彪 李旭刚 肖桂芳 魏晓丽 朱祯 |
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作者单位: | [1]中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京100101 [2]北京师范大学细胞研究所,北京100875 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划“863”项目(2001AA212041,2002AA212031),国家重点基础研究发展规划项目(G2001CB109001)。~~ |
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摘 要: | 建立了一种利用双T-DNA载体培育无选择标记转基因植物的方法。通过体外重组构建了双T-DNA双元载体pDLBRBbarm。载体中,选择标记nptⅡ基因和另一代表外源基因的bar基因分别位于2个独立的T-DNA。利用农杆菌介导转化烟草(Nicotiana tabacum L.),在获得的转化植株中,同时整合有nptⅡ基因和bar基因的频率为59.2%。对4个同时整合有nptⅡ和bar基因植株自交获得的T1代株系进行检测分析,发现在3个T1代株系2个T-DNA可以发生分离,其中约19.5%的转基因T1代植株中只存在bar基因而不带选择标记nptⅡ。这一结果说明双T-DNA载体系统能有效地用于培育无选择标记的转基因植物。研究还利用位于2个不同载体上的nptⅡ基因与bar基因通过农杆菌介导共转化烟草,获得共转化植株的频率为20.0%~47.4%,低于使用双T-DNA转化的共转化频率。
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关 键 词: | 转基因烟草 无选择标记 双T-DNA载体 农杆菌介导 |
Generating Marker-Free Transgenic Tobacco Plants by Agrobacteriummediated Transformation with Double T-DNA Binary Vector |
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Authors: | ZHOU Hong-Yan CHEN Song-Biao LI Xu-Gang XIAO Gui-Fang WEI Xiao-Li ZHU Zhen |
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Institution: | ZHOU Hong-Yan1,2*,CHEN Song-Biao1*,LI Xu-Gang1,XIAO Gui-Fang1,WEI Xiao-Li1,ZHU Zhen1** |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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