| 麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 林娟,陈钰,徐莺,颜钫,唐琳,陈放.麻疯树核糖体失活蛋白基因的克隆和表达[J].Acta Botanica Sinica,2003,45(7):858-863. |
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| 作者姓名： | 林娟 陈钰 徐莺 颜钫 唐琳 陈放 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院，四川大学生命科学学院，四川大学生命科学学院，四川大学生命科学学院，四川大学生命科学学院，四川大学生命科学学院 成都 610064，成都 610064，成都 610064，成都 610064，成都 610064，成都 610064 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关项目(2002BA901A15)~~ |
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| 摘 要： | 麻疯树(Jatropha curcas L.)核糖体失活蛋白(curcin)是存在于麻疯树种子中的一种毒性较强的蛋白,它与蓖麻毒蛋白和相思子毒蛋白的性质相似,属Ⅰ型核糖体失活蛋白。从麻疯树种子中分离得到一种分子量为28.2kD的蛋白质,其对无细胞系统中蛋白质合成的抑制活性较强,IC_(50)为(0.19±0.01)nmol/L,具有RNA N-糖苷酶活性。依据curcin的N端部分氨基酸设计简并引物,通过RT-PCR和5′-RACE技术从未成熟种子总RNA中克隆到curcin全长cDNA序列。该cDNA全长由1 173个碱基组成,包含一个编码293个氨基酸的前体蛋白,前42个氨基酸为信号肽。推测的多肽序列与测定的蛋白质N端序列相同,与多种已发表的Ⅰ型核糖体失活蛋白和Ⅱ型核糖体失活蛋白的A链有一定的同源性。将curcin的编码区与表达载体pQE-30相连后,转入大肠杆菌(Escherichia coil)M15菌株中得到了有效的表达。将表达的融合蛋白纯化后发现,它具有抑制无细胞系统蛋白质合成的能力。
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| 关 键 词： | 麻疯树 基因克隆 原核表达 核糖体失活蛋白基因 |
Cloning and Expression of Curcin, a Ribosome-Inactivating Protein from the Seeds of Jatropha curcas |
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| Authors: | LIN Juan CHEN Yu XU Ying YAN Fang TANG Lin CHEN Fang |
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| Keywords: | Jatropha curcas curcin RNA N-glycosidase cloning in Escherichia coil expression |
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