肺炎克雷伯菌KP1_4563基因突变株的构建及其生物膜表型分析 |
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引用本文: | 刘品,李璇,罗美,苏克文,何蔷,彭丹,张仲双,李迎丽,邱景富.肺炎克雷伯菌KP1_4563基因突变株的构建及其生物膜表型分析[J].基因组学与应用生物学,2019(3):1096-1102. |
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作者姓名: | 刘品 李璇 罗美 苏克文 何蔷 彭丹 张仲双 李迎丽 邱景富 |
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作者单位: | 重庆医科大学公共卫生与管理学院医学与社会发展研究中心健康领域社会风险预测治理协同创新中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31200064;31071093;31170129)资助 |
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摘 要: | KP1_4563基因是肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中假设的蛋白编码基因,与Ⅲ型菌毛的功能有关。本实验首先采用同源重组基因敲除方法构建肺炎克雷伯菌KP1_4563基因缺失的突变株(Kp-△4563),然后PCR扩增KP1_4563基因片段,克隆到质粒p BAD33上,将重组质粒导入Kp-△4563获得回补株(Kpc-△4563)。分别测定野生株、突变株、回补株用普通LB培养基,改良Minka培养基以及含胆汁盐的LB培养基培养时生物膜形成能力,以此来探讨KP1_4563基因以及不同培养基对肺炎克雷伯菌体外生物膜形成的影响。我们成功构建KP1_4563基因缺失的突变株和回补株Kpc-△4563。与野生株相比,突变株Kp-△4563生物膜形成能力减弱,回补株介于野生株和突变株之间。使用改良Minka培养基使菌株菌毛化以及加入胆汁盐可以增加生物膜的形成能力。这些分析表明肺炎克雷伯菌KP1_4563基因能正调控细菌生物膜的形成。体外培养使细菌菌毛化以及加入胆汁盐可以促进生物膜的形成。
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关 键 词: | 肺炎克雷伯菌 KP1_4563 改良Minka培养基 胆汁盐 生物膜 |
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