| 栝楼ISSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 曲超,孙群,丁自勉,王建华,孙宝启.栝楼ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J].基因组学与应用生物学,2009,28(1). |
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| 作者姓名： | 曲超 孙群 丁自勉 王建华 孙宝启 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学农学与生物技术学院,农业部基因组学与遗传改良重点实验室,北京市作物遗传改良重点实验室,北京,100193
2. 中国医学科 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划，国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 用改良SDS法提取栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim)叶片DNA为模板,通过单因素试验研究模板、引物、Taq DNA聚合酶和dNTPs等4因素各7个水平对栝楼ISSR-PCR扩增结果的影响,并通过正交试验对各因子的浓度进行优化,首次建立了栝楼ISSR-PCR分析的最适反应体系:20 μL的反应体系中,1×buffer,模板含量为50 ng,引物的浓度为0.5 μmol/L,Taq DNA聚合酶的用量为0.8 U,dNTPs的浓度为200 μmol/L.随机选取10条引物验证体系稳定性,并对190条ISSR引物初筛,得到条带清晰、多态性好的引物126条.经验证,本实验所建立的栝楼ISSR-PCR反应体系具有稳定可靠、可重复性好、多态性较强等特点,能够较好的应用于栝楼的ISSR分子生物学分析.
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| 关 键 词： | 栝楼 正交设计 体系优化 |
Optimization of ISSR-PCR System in Trichosanthes kirilowii Maxim |
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| Qu Chao,Sun Qun,Ding Zimian,Wang Jianhua,Sun Baoqi.Optimization of ISSR-PCR System in Trichosanthes kirilowii Maxim[J].Genomics and Applied Biology,2009,28(1). |
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| Authors: | Qu Chao Sun Qun Ding Zimian Wang Jianhua Sun Baoqi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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