缺氧复氧诱导自噬基因表达对滋养细胞生长的影响与机制

为探索子痫前期孕妇胎盘病变的发病机制,我们模拟体内缺血再灌注微环境,在体外建立胎盘滋养细胞HTR8/SVneo缺氧复氧模型,以探究缺氧复氧对细胞自噬的诱导作用及对细胞生长的影响。将实验分为对照组、缺氧复氧组及自噬抑制剂3-MA+缺氧复氧组,应用吖啶橙染色及LC3-Ⅱ免疫荧光染色检测经处理24 h后细胞自噬水平,MTT法检测细胞增殖能力,Real time PCR检测自噬基因Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达,Western blot分析相应自噬蛋白的表达。结果显示缺氧复氧组HTR8/SVneo细胞自噬水平明显升高(p0.01),伴随Beclin-1、LC3-Ⅱ基因及蛋白表达显著增高(p0.01),细胞增殖同时显著受抑(p0.01),而加入3-MA后缺氧复氧组细胞自噬水平明显受抑(p0.01),Beclin-1、LC3-Ⅱ基因及蛋白表达显著下降(p0.01),细胞增殖能力显著提高(p0.01)。这表明滋养细胞HTR8/SVneo在缺氧复氧环境中启动细胞自噬,过度自噬时可能通过诱导Ⅱ型程序性死亡影响细胞增殖,当自噬被抑制后,细胞增殖能力明显恢复。