| 摘 要： | 为了筛选小花棘豆Alternaria oxytropis内生真菌最稳定的内参基因,以小花棘豆内生真菌OW7.8菌株为研究对象,ACTIN、TUB、GAPDH、APRT、18S rRNA为候选内参基因,利用qRT-PCR技术,GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件共同评价候选内参基因的表达稳定性;以培养基中分别添加苦马豆素合成前体化合物赖氨酸(L-Lysine acid,L-Lys)、α-氨基己二酸(L-2-Aminoadidpic acid,L-A)和哌啶酸(L-Pipecolic acid,L-P)的不同生长时间的菌株为实验组,不添加为对照,利用qRT-PCR对真菌酵母氨酸还原酶基因(saccharopine reductase gene,Sac)表达分析。研究表明,Actin为表达最稳定的内参基因,实验组Sac表达量均高于对照组;3种前体化合物均促进Sac的表达,其中添加L-P的真菌Sac表达量最高,生长32 d的真菌的表达量达到最大值;添加L-A和L-Lys的真菌Sac表达量分别在生长第26天和第23天达到最大值。本研究结果为探索Sac对苦马豆素合成的影响提供了基础理论数据。
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