| 青花菜ProDH基因的克隆及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 杨鹏,刘莉莎,温常龙,赵立群,赵冰,郭仰东.青花菜ProDH基因的克隆及功能鉴定[J].基因组学与应用生物学,2010,29(2). |
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| 作者姓名： | 杨鹏 刘莉莎 温常龙 赵立群 赵冰 郭仰东 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,农学与生物技术学院,北京,100193 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划)，"十一五"科技支撑计划，中央高校基本科研业务费专项资金 |
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| 摘 要： | 脯氨酸是水分胁迫植物中最常见的渗透保护物质之一,脯氨酸脱氢酶(ProDH)是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶,构建RNAi表达载体转化青花菜可以抑制脯氨酸分解提高其抵抗干旱胁迫和盐胁迫的能力。本研究利用同源重组和RACE技术克隆青花菜脯氨酸脱氢酶基因(ProDH),以酶切、连接的方法利用载体pFGC1008构建植物RNAi表达载体pFGC-PDHi。序列分析表明,本文首次克隆了1595bp的青花菜脯氨酸脱氢酶基因cDNA全长,该序列编码498个氨基酸;序列比对发现该核酸序列与拟南芥、甘蓝型油菜、芜菁分别有83.26%、89.07%和97.73%的同源性,其氨基酸序列和拟南芥、甘蓝型油菜、芜菁分别有89.78%、91.38%和98.80%的同源性。测序和酶切鉴定表明青花菜ProDH基因RNA干扰表达载体已经构建成功,并将其转化青花菜得到转化株,经PCR检测,转化株均为阳性株,证明干扰载体的T-DNA区已经成功地整合到了青花菜基因组中。研究还发现在外源的L-脯氨酸存在时,转化株的脯氨酸脱氢酶的活性受到了明显的抑制。本研究为青花菜的抗旱育种提供了非常有价值的新种质材料。
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| 关 键 词： | 青花菜 脯氨酸脱氢酶 ProDH基因 RNA干扰 转化 |
Cloning and Functional Identification of ProDH Gene from Broccoli |
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| Yang Peng,Liu Lisha,Wen Changlong,Zhao Liqun,Zhao Bing,Guo Yangdong.Cloning and Functional Identification of ProDH Gene from Broccoli[J].Genomics and Applied Biology,2010,29(2). |
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| Authors: | Yang Peng Liu Lisha Wen Changlong Zhao Liqun Zhao Bing Guo Yangdong |
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