| 重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体在昆虫杆状病毒中的表达 |
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| 引用本文： | 马玲,邵帅,潘汉世,陈凤莲,黄红梅,石胜,吴健敏.重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体在昆虫杆状病毒中的表达[J].基因组学与应用生物学,2013,0(3):314-318. |
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| 作者姓名： | 马玲 邵帅 潘汉世 陈凤莲 黄红梅 石胜 吴健敏 |
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| 作者单位： | 马玲(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；邵帅(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；潘汉世(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；陈凤莲(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；黄红梅(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；石胜(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)；吴健敏(广西兽医研究所，广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁，530001)； |
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| 基金项目： | 广西“新世纪十百千人才工程”人选专项经费(项目编号：桂人办发〔2005〕32号)广西水产畜牧兽医局项目(项目编号：桂鱼牧科2003-65-06)广西自然科学基金(项目编号：桂科自0991220) |
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| 摘 要： | 重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体是由一条短肽链将两个鼠源抗CD22mAb的scFv连接起来,再与人IgG1的CH3片段连接所获得重组基因工程抗体(cRFB4-CH3),是目前开发治疗B细胞系淋巴瘤的人源化基因工程抗体。为探讨该重组基因工程抗体高效表达技术,本研究利用DNA重组技术将含有人IgG1的CH3段的抗人CD22四价基因工程抗体基因克隆到含信号肽的重组杆状病毒载体pAcSG2中,构建重组质粒pAcSG2-cRFB4-CH3并转染到Sf9细胞中,构建携带有重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体基因的重组杆状病毒AcNPV-cRFB4-CH3。通过对该重组毒进行PCR和IFA鉴定,证实获得了可以稳定表达抗人CD22四价基因工程抗体的重组杆状病毒。以蚀斑试验进一步纯化病毒,经过3次病毒蚀斑克隆,获得毒价达到4.5×107pfu/mL重组病毒,为治疗白血病药物的开发和应用打下了基础。
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| 关 键 词： | CD22 人源化 基因工程抗体 杆状病毒 表达 |
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